雪上一枝蒿甲素的应用

背景及概述^[1][2]

雪上一枝蒿甲素的速效止痛搽剂目前收载于卫生部标准(简称部颁标准)中药成方制剂第二十册的雪上一枝蒿甲素速效止痛搽剂，雪上一枝蒿甲素的速效止痛搽剂主要由雪上一枝蒿甲素和其他中药材通过浸泡而得制剂，主要功能为舒筋活血、消肿止痛，用于跌打损伤(软组织扭伤、挫伤等)和各种关节痛。

目前生产该品种的国内制药厂家有云南一枝蒿制药有限公司、云南省玉溪市维和药业有限公司两家，受当时历史条件的制约，无论从检测方法，还是该品种质量标准，目前部颁标准已很难适应当今社会对药品质量控制的要求，为保障广大患者用药安全、有效、可控，云南一枝蒿制药有限公司作为雪上一枝蒿甲素速效止痛搽剂标准提高起草者，特别针对含量测定项下，原部颁标准含量测定方法为紫外分光光度法测定雪上一枝蒿甲素总碱含量。

该方法是利用对照品吸光度与样品的吸光度相比较来测定雪上一枝蒿甲素总碱含量，由于样品中含有多糖、色素等杂质，此方法存在干扰大，重现性差，且以混合物雪上一枝蒿甲素控制成品质量，不具专属性，也不能真实有效的控制样品中的雪上一枝蒿甲素含量。

理化性质及结构^[1]

雪上一枝蒿为毛茛科乌头属植物短柄乌头的块根(Aconitum brachypodum Diels)。主产于云南省昆明市东川，生长于海拔2800米以上的高寒山区，早在明清年代民间就广泛用于治疗各种疾病，主用于跌打损伤、风湿疼痛。雪上一枝蒿甲素，药效和临床研究证明本品能抑制炎症、降低毛细血管通透性、减少炎性渗出和水肿。对风湿痛、跌打损伤、各类关节炎、急慢性劳损等炎症肿痛有镇痛抗炎消肿等作用，对肝肾未见明显毒性。

目前市售的有雪上一枝蒿甲素水针剂，尚未见有关乳剂的报道。由于雪上一枝蒿甲素生物碱水针剂临床使用起来刺激性很大，是一种既不溶于油也不溶于水的物质。

雪上一枝蒿甲素

应用^[3]

1. 生物碱乳

雪上一枝蒿甲素0.005％～0.5％、甾醇及其衍生物0.01％～1.0％、生育酚0.01％～1.0％、磷脂1.0％～6.0％、2％-6％油酸乙酯、植物油5％～20％、甘油1.0％～6.0％、油酸1.0％～6.0％，注射用水添至100ml。

称取雪上一枝蒿甲素20-200mg溶于0-5ml苯甲酸卞酯和0-2ml乙醇中，加入生育酚0.1-1g、胆固醇油酸酯0.1-1.0g，充分搅拌，加入2-6g油酸乙酯、15g精制植物油或中链油或两者的混合物和0.1-3g油酸，于50℃～80℃高速搅拌使混合均匀，除去乙醇制成油相；称取蛋黄卵磷脂2.0g、甘油3g，加入处方量的水于50℃～80℃高速搅拌使充分分散，制成水相。油水两相混合，于50℃～80℃高速搅拌制成初乳剂。取初乳剂，注射用水定容至处方量，调节PH值为5.0～9.0，转移至高压乳匀机中，反复乳化至乳滴平均粒径≤1微米，除菌过滤，充氮气灌装，灭菌既得。

2. 止痛搽剂

第1步、取雪上一枝蒿甲素30Kg、生川乌10Kg、生草乌16Kg、红花20Kg，混合均匀后，得到混合物I，加入混合物I的3倍重量的乙醇，所述的乙醇的质量浓度为60%，浸提1次，浸提的时间为10天，合并浸提液，得到浸提液；

第2步、取金叶子10Kg，加水，加热提取，水的重量是金叶子的重量的3倍，提取时间是2h，得到第二浸提液；

第3步、取乳香4Kg、黑骨头5Kg、川芎3Kg、金铁锁5Kg、重楼3Kg、附子2Kg、见血飞6Kg、冰片20Kg，分别粉碎成直径1cm的颗粒，混合均匀后，得到混合物II，加入混合物II的3倍重量乙醇，所述的乙醇的质量浓度为50%，浸提1～3次，浸提的时间为10天，合并浸提液，得到第三浸提液；

第4步、合并浸提液、第二浸提液、第三浸提液，并调整乙醇的质量浓度在60%，即可。

质量控制方法^[2]

A、色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为60∶40的甲醇-磷酸盐缓冲溶液为流动相；检测波长为210±2nm；理论板数按雪上一枝蒿甲素峰计算应不低于3000；

所述的磷酸盐缓冲溶液的制备方法是取磷酸氢二钠1.97g和磷酸二氢钾0.22g，加水溶解并稀释至1000mL，用质量浓度为80％的磷酸溶液调节pH至7.3；

B、对照品溶液的制备：取雪上一枝蒿甲素对照品加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得；

C、供试品溶液的制备：取雪上一枝蒿速效止痛搽剂，蒸去搽剂中的乙醇，然后加入重量是所取搽剂重量1倍的水并溶解，之后加入重量是所取搽剂重量0.2倍的氨试液，接着用二氯甲烷提取，得到二氯甲烷提取液，二氯甲烷提取液经水洗后，再采用无水硫酸钠脱水，滤过，收集滤液；滤液于60℃水浴上挥至近干，之后加甲醇并溶解，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

主要参考资料

[1]白一岑,李艳杰,&马云淑.(2008).石菖蒲等3种挥发油对雪上一枝蒿甲素经皮渗透的影响.中国中药杂志,33(05),513.

[2]高绍阳,喻萍,陈武元,杨金永,&余仕汝.(2005).Rp-hplc法测定雪上一枝蒿中雪上一枝蒿甲素含量.药物分析杂志(11),1382-1384.

[3]来国防,黄嬛,林文涛,周平,&王梅.(2009).Hplc法测定雪上一枝蒿速效止痛搽剂中雪上一枝蒿甲素.河南大学学报(医学版),28(3),168-169.