薄层层析硅胶板的原理与使用方法

薄层层析是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几毫克，甚至0.01毫克）的分离，另一方面再制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精致样品，此法特别适用于发挥性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。在此过程中要用到薄层层析硅胶板。

薄层层析硅胶板的原理

薄层色谱是吸附色谱，在展开过程中，利用各组分在两相之间发生多次吸附-解吸附平衡，吸附强的组分随展开剂移动慢，吸附弱的组分随展开剂移动快，一段时间后，各组分被分离，各组分在薄层板上形成不同距离的斑点。

溶剂的选择

层析过程中溶剂的选择，对组分分离关系极大。在柱层析时所用的溶剂（单一剂或混合溶剂）习惯上称洗脱剂，用于薄层或纸层析时常称展开剂。洗脱剂的选择，须根据被分离物质与所选用的吸附剂性质这两者结合起来加以考虑。

在用极性吸附剂进行层析时，当被分离物质为弱极性物质，一般选用弱极性溶剂为洗脱剂；被分离物质为强极性成分，则须选用极性溶剂为洗脱剂。如果对某一极性物质用吸附性较弱的吸附剂（如以硅藻土或滑石粉代替硅胶），则洗脱剂的极性亦须相应降低。

薄层层析硅胶板的应用

（1）定性鉴别；

（2）药品的质量控制和杂质检查；

（3）化学反应进程的控制；

（4）柱色谱分离条件的探索。

使用方法

在柱层操作时，被分离样品在加样时可采用干法，亦可选一适宜的溶剂将样品溶解后加入。溶解样品的溶剂应选择极性较小的，以便被分离的成分可以被吸附。然后渐增大溶剂的极性。这种极性的增大是一个十分缓慢的过程，称为“梯度洗脱”，使吸附在层析柱上的各个成分逐个被洗脱。

如果极性增大过快（梯度太大），就不能获得满意的分离。溶剂的洗脱能力，有时可以用溶剂的介电常数（ε）来表示。介电常数高，洗脱能力就大。以上的洗脱顺序仅适用于极性吸附剂，如硅胶、氧化铝。对非极性吸附剂，如活性炭，则正好与上述顺序相反，在水或亲水住溶剂中所形成的吸附作用，较在脂溶性溶剂中为强。