伐昔洛韦的制备

背景及概述^[1][2]

伐昔洛韦是阿昔洛韦的L-缬氨酰酯前药。阿昔洛韦是天然核苷的无环类似物，被发现具有高抗病毒活性。阿昔洛韦广泛用于治疗与预防人类病毒感染，尤其是疱疹族病毒引起的感染，参见Goodman和Gilman的The Pharmacological Basis of Therapeutics 1193-1198(第9版，1996)。美国食品与药物管理局已批准伐昔洛韦用于治疗带状疱疹和生殖疱疹。

盐酸伐昔洛韦是市售的，对于口服给药，给予伐昔洛韦而非阿昔洛韦则是更有利的；因为不但在动物中而且在人中，由胃肠道吸收的阿昔洛韦很少。比较起来，伐昔洛韦在口服后，迅速被胃肠道吸收。

盐酸伐昔洛韦是阿昔洛韦的前体药物，口服后吸收迅速并在体内很快转化为阿昔洛韦，其抗病毒作用为阿昔洛韦所发挥，药物被磷酸化成活化型无环鸟苷三磷酸酯，与脱氧核苷竞争病毒胸腺嘧啶激酶或细胞激酶，与脱氧鸟嘌呤三磷酸酯竞争病毒DNA多聚酶，从而抑制了病毒DNA合成，显示抗病毒作用。此外，在口服给药后，伐昔洛韦在健康成人体内被迅速转化为阿昔洛韦。有人认为伐昔洛韦的转化起因于关卡肠和肝脏由于酶促水解而代谢。

理化性质及结构^[1]

伐昔洛韦的化学名称为1-缬氨酸，2-[(2-氨基-1，6-二氢-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲氧基]乙酯。(CAS登记号124832-26-4)。伐昔洛韦目前以VALTREX商标在市场上销售。伐昔洛韦的化学结构如结构式I所示：

结构式I

检测方法^[3]

一种高效液相色谱测定伐昔洛韦含量的方法，包括以下步骤：

1)准确称取25mg待测样品，置50ml量瓶中，加20ml甲醇溶解，然后用流动相A稀释并定容，得到供试品溶液，供试品溶液配制两组，即供试品溶液1和供试品溶液2，同时做空白试验；

2)准确称取25mg对照品，置50ml量瓶中，加20ml甲醇溶解，然后用流动相A稀释并定容，得到对照品溶液，对照品溶液配制两组，即对照品溶液1和对照品溶液2；

3)采用高效液相色谱分别对供试品溶液和对照品溶液进行检测，检测条件为：

色谱柱：C18柱；

柱温：25℃；

检测波长：251nm。

流动相：

流动相A0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液与甲醇的混合溶液，体积比为80:20；

流动相B0.01mol/L的磷酸二氢钾溶液与甲醇的混合溶液，体积比为25:75；

具体梯度洗脱参数见表1：

表1

理论塔板数根据供试品进行计算，不低于5000。

按照上述条件，分别对供试品溶液和对照品溶液进行检测，进样量为20μl，调节色谱系统及检测灵敏度，记录色谱图，每种溶液分别进样2次，其中供试品溶液1的色谱图如图1-2所示，供试品溶液2的色谱图如图3-4所示，对照品溶液1的色谱图如图5-6所示，对照品溶液2的色谱图如图7-8所示，空白溶液的色谱图如图9所示，最后按外标法以峰面积计算，得到供试品中伐昔洛韦含量。

具体计算公式是：

伐昔洛韦含量＝(对照品质量*供试品峰面积)/(对照品峰面积*供试品质量)

该实施例中，对照品质量1为：24.8mg，对照品质量2为：24.5mg，供试品质量1为25.6mg，供试品质量2为25.1mg，对照品峰面积1为17324.7,17320.8，对照品峰面积2为17113.7,17105.0；供试品峰面积1为17486.9,17487.7，供试品峰面积2为17059.6,17069.7；

每组计算伐昔洛韦含量，最后计算平均值和标准偏差；伐昔洛韦含量平均值为97.5％。RSD为0.27％。

制备^[2]

1. N-t-BOC-伐昔洛韦(N-叔丁氧羰基-L-缬氨酸2-[(2-氨基-1，6-二氢-6-氧代-9H-嘌呤-9-基)甲氧基]乙酯)

将N-t-BOC-L-缬氨酸(2.9g，13.2mmol)、阿昔洛韦(2.3g，10mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(3.0g，15mmol)、4-(二甲氨基)吡啶(0.2g，1.6mmol)和三乙胺(1.4g，13.9mmol)在二甲基甲酰胺(15ml)中的悬浮液在约0℃下搅拌约4小时，然后在室温下搅拌过夜。向该反应混合物中加入追加量的N-t-BOC-L-缬氨酸(0.3g，1.36mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.3g，1.5mmol)，然后继续搅拌过夜。把0.3N盐酸溶液(53ml)在约0℃下加入到澄清溶液中，得到白色沉淀，然后将所得悬浮液在约0℃下搅拌约1小时。滤出沉淀并减压干燥，得到N-t-BOC-伐昔洛韦(4.1g，97％)，经HPLC测定，其纯度为98.2％。

2. 由N-t-BOC-伐昔洛韦制备盐酸伐昔洛韦

向溶于水(22ml)的N-t-BOC-伐昔洛韦(9.0g，21mmol)悬浮液中滴加12N盐酸溶液(8ml，96mmol)，然后将其在室温下搅拌约3.5小时，在这段时间内，该悬浮液消失而形成混浊溶液。把该溶液冷却至约0℃，将其与异丙醇(500ml)混合，此后，形成沉淀。将所得悬浮液在约0℃下搅拌约1小时，然后在约4℃下保持过夜。滤出白色沉淀并于约40-50℃减压干燥至恒重，得到盐酸伐昔洛韦(7.0g，92％)，经HPLC测定，其纯度为97.9％。

将盐酸伐昔洛韦(2.0g)与乙醇(100ml)一起在回流条件下研磨约1小时，然后冷却至室温。滤出白色沉淀并于约40-50℃减压干燥至恒重，得到盐酸伐昔洛韦(1.3g，65％)，经HPLC测定，其纯度为99.27％。

3. 伐昔洛韦

在约20-25℃，向溶于水(22ml)的N-t-BOC-伐昔洛韦(9.0g，21mmol，1当量)浆液中滴加12N盐酸溶液(8.0ml，96mmol，4.6当量)，然后在同样的温度下搅拌约3.5小时。在这段时间内，所得浆液消失而形成油状溶液。在约0-5℃，向搅拌的溶液中加入异丙醇(500ml)。将所得悬浮液在同样的温度下搅拌过夜。滤出沉淀固体并于约20-30℃减压干燥至恒重，得到盐酸伐昔洛韦(7.0g，92％)，经HPLC测定，其纯度为97.93％；二环己基脲＜0.1％，而未反应的N-t-BOC-缬氨酸在约0.1％和0.2％之间(通过薄层色谱(TLC)估计)。

将盐酸伐昔洛韦(2.0g)与乙醇(100ml)一起在回流条件下搅拌约1小时，然后在室温下搅拌约30分钟。将该悬浮液过滤并于约40℃减压干燥，得到伐昔洛韦(1.3g，65％)，经HPLC测定，其纯度为99.27％。

主要参考资料

[1]王丽, & 何柱裕. (2007). 伐昔洛韦治疗带状疱疹52例临床观察. 山东医药, 47(25), 51-51.

[2]叶兴东, & 张锡宝. (2007). 阿昔洛韦和伐昔洛韦的临床应用及其安全性研究进展. 中国麻风皮肤病杂志, 23(8), 705-707.

[3]郑桂香, 张玉, & 余兰. (2013). 伐昔洛韦联合干扰素治疗带状疱疹的疗效观察. 广东医学, 34(23), 3660-3661.