G-418硫酸盐的应用

简介

G-418硫酸盐是一种氨基糖苷类抗生素，主要抑制真核生物中的蛋白质合成。由nptII和G418硫酸盐组成的一组已用于植物真菌病原体尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）的遗传转化。通过聚乙二醇（PEG）介导的转化方法获得的抗G418硫酸盐的须须癣菌的分子分析表明，它们的染色体上含有nptII。这些菌落在生长的菌丝体中也显示eGFP基因的表达。因此，G418硫酸盐用于皮肤癣菌遗传转化是很有效的[1]。

图1 G-418硫酸盐。

用途

与其他病毒感染（如HIV、HBV、HCV、流感和疱疹病毒）相比，登革热病毒感染在全球发病率（估计有25亿人处于危险中）以及缺乏有效的预防措施（即疫苗接种），但从（化疗）治疗的角度来看，登革热病毒的感染很少受到关注。然而，登革热病毒的复制周期提供了大量潜在的靶位点，包括病毒吸附和融合、RNA依赖性RNA聚合酶（以及相关的2'-O-甲基转移酶）和N-糖基化过程。已鉴定出许多干扰登革热病毒感染的化合物（即利巴韦林、干扰素、硫酸多糖、2'-C甲基核苷类似物和亚氨基糖衍生物）。对于发现对登革热病毒有效的其他化合物，包括遗传素（G418硫酸盐）和FGI-106，其作用机制仍悬而未决。尤其G418硫酸盐对登革热病毒由较好的抑制作用。能够穿透细胞膜有效地阻断登革热病毒对免疫系统的侵害[2]。

此外，G418硫酸盐用于盘状网柄菌标记蛋白异位表达的载体。这些载体允许添加N端或C端标签（GFP、mRFP、3xFLAG、3xHA、6xMYC或TAP），该标签具有优化的多链接序列，并且在蛋白质的N端或C-端没有额外的氨基酸残基。将表达盒导入含有Blasticidin或Geneticin抗性标记的载体中，并导入整合质粒和染色体外质粒中。载体被设计为高拷贝和低拷贝版本，因此允许有限的表达水平控制。它们在互补、共转化和超转化方面也很方便[3]。

参考文献

[1] E. De Clercq, Strategies for the treatment of dengue virus infections: a narrative account, FUTURE MEDICINAL CHEMISTRY 2(4) (2010) 601-608.

[2] T. Yamada, K. Makimura, T. Hisajima, M. Ito, Y. Umeda, S. Abe, Genetic transformation of the dermatophyte, Trichophyton mentagrophytes, based on the use of G418 resistance as a dominant selectable marker, JOURNAL OF DERMATOLOGICAL SCIENCE 49(1) (2008) 53-61.

[3] M. Dubin, W. Nellen, A versatile set of tagged expression vectors to monitor protein localisation and function in Dictyostelium, GENE 465(1-2) (2010) 1-8.