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D-丙氨酸

发布日期:2023/1/30 10:38:45

D-丙氨酸是一种重要的手性有机化合物,主要应用于手性药物、药物中间体、食品添加剂等领域,在制药、食品行业作为手性合成的手性原料。作为一种结构最简单的具有光学活性的氨基酸,在某些手性化合物的不对称合成过程中具有不可替代的作用,目前主要用于生产新型广谱抗生素、D-丙氨醇、多肽、新型甜味剂阿力甜(Alitame),其中合成新型甜昧剂阿力甜(Alitame)为该产品提供了巨大的市场空间。

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制备方法

已知的制取D-丙氨酸的技术方法主要有“生物发酵法”、“不对称化学合成法”、“氨 基酸酰化酶拆分法”。其中“发酵法”生产周期长,设备投资大,有副反应,分离较复杂、污染 大成本高;“不对称化学合成法”反应机制复杂,工艺过程长;需要纯手性试剂或贵金属络 合物作催化剂,生产成本极高,以上两种方法不具备工业化应用价值,目前国内外工业化生产D-丙氨酸普遍采用“氨基酸酰化酶拆分法”,该法利用的氨基酸价格昂贵,生产成本仍然 较高,只能用于小规模工业化生产。

由于D-丙氨酸的生理作用被不断发现,其应用越来越广泛,需要研究开发一种适合大规模工业工业化、能显著降低生产成本的技术。依据生物的不对称降解或同化作用机理,研究生产手性氨基酸的方法,是一个重要的方向。本发明也是基于此原理。

一种D-丙氨酸微生物制备方法,包括:

1)分解L-丙氨酸的微生物细胞悬液的制作:将碳源、氮源、无机盐、水和诱导物L-丙氨酸按比例配制培养基,用酸或碱将其PH值调 节到4-7. 5 ;然后,接入经筛选出来的能够产生分解L-丙氨酸酶的微生物,用旋转震荡器或 发酵罐通风培养12-48小时,培养温度为25°C -40°C。

2)酶催化不对称降解反应:向培养好的细胞悬液液体中不断流加底物DL-丙氨酸,使反应体系中的氨基酸氧化酶特异性的氧化分解L-丙氨酸,并放出氨气,通过加大通风量或加入硫酸的手段降低溶液PH 值,使溶液中的PH值维持在4.5-8.0 ;反应温度28-68°C。

3)产物提取分离:通过向转化体系中不断加入DL-丙氨酸,增加D-丙氨酸的浓度,使D-丙氨酸从反应体系中结晶出来,通过离心分离得到粗品;

4) D-丙氨酸的精制:粗品通过活性炭脱色、过滤、重结晶,即得精制的D-丙氨酸成品; 其特征在于:所述培养基中的碳源为单独或混合使用的碳水化合物中的葡萄糖、蔗糖、 淀粉、糊精、麦芽汁和糖蜜;氮源为单独或混合使用的各种动物植物蛋白胨、豆饼水解液、硫 酸铵、酵母提取物和玉米浆;无机盐为单独或混合使用的氯化钠、硫酸镁、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾。

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