鲁斯可皂苷元的作用

背景及概述^[1-2]

麦冬Ophiopogonis Radix 为百合科植物麦冬Ophiopogon japonicus( Linn．f．) Ker -Gawl． 的干燥块根，味甘、微苦，归心、肺、胃经，有养阴生津、润肺清心等功效，常用于治疗肺燥干咳、阴虚痨嗽、喉痹咽痛、津伤口渴等症麦冬中所含化学成分主要有皂苷类、黄酮类、氨基酸类、多糖类及挥发油等。研究表明，麦冬有抗心肌缺血、降血糖、抗炎、抗肿瘤、增强免疫等作用。麦冬甾体皂苷是麦冬的主要活性成分，鲁斯可皂苷元是其药材质量控制的关键性指标。

鲁斯可皂苷元（Ruscogenin），又名假叶树苷元，鲁斯可皂苷元最早是从地中海地区的假叶树（Ruscus aculeatus L.）中分离得到，也是常用滋阴中药麦冬（Ophiopogon japonicus ( L.f) Ker-Gawl）的主要有效成分之一。《中华人民共和国药典》自 2010 年版起收载以鲁斯可皂苷元作为麦冬总皂苷含量测定质量评价标准物质。

结构

药理作用及应用^[1]

1.抗炎作用

鲁斯可皂苷元具有显著抗炎作用，鲁斯可皂苷元发挥抗炎作用的机制之一可能是通过干扰蛋白激酶 C 信号通路进而阻滞淋巴细胞迁移到细胞外基质中。对麦冬水提物进行研究，实验表明麦冬皂苷 D 及其鲁斯可皂苷元为其主要活性成分，在体内外具有明显的抗炎活性，体外可明显抑制佛波酯诱导的 ECV304 细胞与 HL-60 细胞的黏附。

进一步考察鲁斯可皂苷元对细胞因子 TNF-A 诱导的 ECV304 细胞与HL-60 细胞黏附的影响，研究表明，鲁斯可皂苷元可通过抑制 HL-60 细胞与活化的 ECV304 细胞之间的黏附作用，发挥抗炎活性。鲁斯可皂苷抗炎的分子机制可能与其能抑制炎症以及血管病变中内皮细胞对细胞因子的反应相关。

研究鲁斯可皂苷元对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠炎症反应的影响，结果表明鲁斯可皂苷元可通过抑制肺血管炎症反应、降低肺动脉压及肺小动脉厚度防治肺动脉高压。鲁斯可皂苷元可通过 NF-Kappa B 介导的炎症信号通路减轻实验性中风的大鼠大脑的缺血损伤。 

2.抗血栓作用 

鲁斯可皂苷元具有抗血栓作用，对于口服二磷酸腺苦的大鼠和小鼠模型，鲁斯可皂苷元可以显著抑制其血小板的聚集，而且通过每日1 次口服鲁斯可皂苷元可以剂量依赖性抑制因下腔静脉结扎而导致的静脉血栓的形成，为以后临床血栓性疾病的治疗提供依据。

3.抗肿瘤作用

鲁斯可皂苷元具有抗肿瘤作用，研究发现从麦冬中提取的鲁斯可皂苷元对 Hela 和 SMMC-7721 细胞均有细胞毒性作用，进而可以起到抗肿瘤的作用。以人肺癌 A549 和 H460 细胞为研究对象，对周氏克金岩方中麦冬的有效活性成分鲁斯可皂苷元进行药理研究，表明鲁斯可皂苷元可抑制人肺癌 A549 和 H460 细胞的增殖，诱导其凋亡，具体机制可能与其能促进 p53、p21 蛋白的表达，降低 cyclin E2 和 CDK2 蛋白的表达，进而使细胞阻滞于 S 期相关。 

4. 抗应急作用

鲁斯可皂苷元具有脑缺血缺氧保护作用，采用小鼠断头致全脑缺血缺氧模型，通过观察小鼠断头呼吸维持时间，考察鲁斯可皂苷元抗脑缺氧活性及其量效时效关系；采用双侧颈总动脉结扎再灌注模型，考察鲁斯可皂苷元对脑组织含水量、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及Na+-K+-ATP  酶活性、Ca2+-ATP  酶活性等生化指标的影响。

研究表明鲁斯可皂苷元在一定剂量范围内，明显改善小鼠脑缺血缺氧损伤，减轻缺血再灌注导致的脑水肿、氧化损伤和能量代谢障碍，具有起效较快，维持时间较长的作用特点。用线栓法制备大鼠脑缺血-再灌注损伤的动物模型，探讨了鲁斯可皂苷元预处理对脑缺血-再灌注损伤大鼠的保护作用机制，结果表明：鲁斯可皂苷元对缺血-再灌注大鼠脑损伤的保护作用比较明显，此作用可能是通过提高SOD 的活性，增加其清除自由基能力，减轻氧化损伤以及抑制细胞凋亡来实现。

5. 增强内皮细胞活力作用

此外，鲁斯可皂苷元可增强内皮细胞活力，抑制TNF-α  刺激后的白细胞对静脉内皮细胞的粘附，改善脂多糖诱导急性肺损伤，降低毛细血管通透性、调节前列腺功能失调、抑制 G+菌、抗弹性蛋白酶、能降低血清及组织的 NO、MDA 水平，改善脑部血液循环等作用，保护各组织免受自由基攻击，对心、肺作用更明显并下调肺组织 TF 基因表达，具有很好的药用前景。

制备^[2-3]

方法1：取麦冬药材2 kg，粉碎，过20 目筛，置圆底烧瓶中，用10 倍量80%乙醇加热回流提取3 次，每次1 h，合并提取液，减压回收乙醇至无乙醇味，得总皂苷浸膏。采用两相酸水解法，将总皂苷浸膏置圆底烧瓶中，加入10 倍量5% 硫酸(下层) ，6 倍量石油醚与二氯甲烷( 3 ∶1) 混合液，加热水解5 h，冷却后得酸水层和有机层，用等体积的二氯甲烷萃取酸水层3 次，与有机层合并，用水洗至pH 接近7，浓缩至干，得浸膏。

将硅胶( 200 ～ 300 目)石油醚湿法装柱。将酸水解得到的浸膏用硅胶( 100 ～200 目) 拌样，挥干溶剂，干法上样，进行柱色谱分离。用二氯甲烷-石油醚-甲醇( V ∶ V ∶ V，10 ∶ 10 ∶ 1) 洗脱，收集馏分，根据薄层色谱检识，合并相同斑点的馏分。含有鲁斯可皂苷元的馏分浓缩后放置，析出白色针晶，即为鲁斯可皂苷元粗品，粗品用甲醇重结晶多次，即得鲁斯可皂苷元纯品。

方法2：一种鲁斯可皂苷元制备新方法，包括如下步骤：

(1)配制提取液：提取剂为乙醇，甲醇或丙酮中之一，提取剂用盐酸、硫酸或磷酸中之一调节pH1～2，加入0.5～1％的亚硫酸氢钠。

(2)鲁斯可皂苷元的提取：在多功能提取罐中逆流强制循环提取三次， 次10倍量(V/W)回流下提取2.0～5.0h；第二次8倍量(V/W)回流下提取1.5～ 4.0h；第三次6倍量(V/W)回流下提取1.0～2.0h。

(3)提取液中和，浓缩：以饱和氢氧化钠或氢氧化钾溶液将提取液中和至中 性，减压浓缩至比重1.05～1.10，得到鲁斯可皂苷元浓缩液。

(4)浓缩物脱脂除杂：以正己烷，石油醚，6号溶剂油，乙醚中之一提取3 次，次5倍量(V/W)萃取脱脂，第二次4倍量(V/W)萃取脱脂，第三次 3倍量(V/W)萃取脱脂，收集脱脂后的液体，脱脂溶剂回收。

(5)鲁斯可皂苷元的萃取：脱脂后液以乙酸乙酯，三氯甲烷，二氯甲烷萃取中之一等体积萃取3～5次，收集萃取液。

(6)萃取液浓缩与反萃取：将萃取液浓缩至一半体积，以等体积的1～5％碳 酸钠或碳酸氢钠溶液萃取1～3次，弃去碱水液，得到浅黄色的鲁斯可皂苷元萃 取液。

(7)脱色，浓缩，结晶：加入萃取液5～10％(W/V)的活性炭，在40～60℃ 加热30min，趁热过滤，得到脱色鲁斯可皂苷元萃取液，将其浓缩至比重1.10～ 1.15，放置，结晶

(8)过滤，洗涤，干燥：结晶物过滤后加入正己烷，石油醚，6号溶剂油，乙醚中之一，再滴加少量甲醇或乙醇，搅拌均匀，直至洗去色素为止，真空干燥，得到白色鲁斯可皂苷元。

主要参考资料

[1] 鲁斯可皂苷元的制备工艺

[2] 鲁斯可皂苷元制备方法研究

[3] CN201510009375.9 一种鲁斯可皂苷元制备新方法