脱氧核苷酸的制备方法

三磷酸脱氧核苷是DNA分子的结构基础。作为各种DNA聚合酶的反应底物，是DNA合成、DNA序列分析、基因分析、定点突变、各种聚合酶链式反应（PCR)等体系中必不可少的组成部分。而上述技术是现代生命科学高速发展的产物，在分子生物学、生物化学、药学、医学等领域起着至关重要的作用。

尤其是PCR技术，因其具有操作简单、周期短、反应灵敏等特点，在分子克隆、生物工程、生物医药研发、遗传和传染性疾病诊断、法医鉴定、亲子鉴定等领域得到越来越广泛的应用。生物技术尤其是PCR技术的迅猛发展及其应用领域的迅速 扩大，使国内外对三磷酸脱氧核苷系列产品的需求日益增长，产品市场前景非常广阔。

单磷酸脱氧核苷是制备三磷酸脱氧核苷的必须中间体。传统的单磷酸脱氧核苷制备方法是通过生物酶促水解法或化学水解法水解脱氧核糖核酸获得单磷酸脱氧核苷。具有底物转化率低，产物收率低，成本高，反应条件不易控制，产物复杂等缺点。

制备方法

一种制备脱氧核苷酸的方法，以解决传统的通过生物酶促水解法或化学水解法水解脱氧核糖核酸获得单磷酸脱氧核苷时，存在的底物转化率低、产物收率低、成本高、反应条件不易控制、产物复杂的问题。

其特征在于包括下列步骤：

将分子量为340〜984Da的氨基葡萄寡糖和过渡态金属离子按1:1〜1:10的摩尔 比加入到反应体系中，使氨基葡萄寡糖的浓度达到0. 1 μ M〜10. 0 μ M，加入水解底物脱氧 核糖核酸至终浓度lmg/mL〜100mg/mL，以缓冲液控制反应体系pH 4〜11，于20°C〜40°C 反应1小时〜12小时；反应液用去离子水稀释1〜100倍后用离子交换层析介质进行吸附，然后经平衡，除杂，洗脱，获得目的物dAMP、dCMP、dGMP和dTMP。