2型补体受体抗体

背景^[1-3]

2型补体受体抗体是一类可以特异性结合2型补体受体的多克隆抗体蛋白，主要用于需要检测2型补体受体的相关实验。

补体是一种血清蛋白质，存在于人和脊椎动物血清及组织液中，不耐热，活化后具有酶活性、可介导免疫应答和炎症反应。可被抗原-抗体复合物或微生物所激活，导致病原微生物裂解或被吞噬。可通过三条既独立又交叉的途径被激活，即经典途径、旁路途径和凝集素途径。

2型补体受体即CD21，补体片段C3d、C3dg的受体。主要表达于人成熟B细胞和滤泡树突状细胞表面，可调节B细胞活化、增殖和IgE产生，也是EB病毒受体，与鼻咽癌发生相关。

2型补体受体抗体

补体受体complement receptor存在于不同细胞膜表面，能与补体激活过程所形成的活性片段相结合，介导多种生物效应的受体分子。

对补体第三成分（C3）的受体，存在于多形核白血球、巨噬细胞、B细胞、人O型血的红细胞、哺乳动物的血小板中．在补体活化途径的途径，在抗原抗体复合体上是按C1→C4→C2→C3的顺序进行反应；第二途径是在血清中各种因子的存在下，譬如对细菌细胞壁等成分C3进行反应。进行反应的C3活化后，分为C3a和C3b，而C3b可附着于抗原和细菌多形核白细胞（特别是嗜中性细胞）和巨噬细胞，通过C3b受体对物质进行捕捉，经吞噬作用进入细胞内。B细胞的补体受体，虽然有与T细胞区别的标记，但其作用并不清楚；而红细胞和血小板的受体的作用也不清楚，但利用它所进行的免疫粘结法则是补体的定量法之一。对C3b分解产物的C3d的受体也认为是巨噬细胞和B细胞，但反应性较弱．

应用^[4][5]

用于B淋巴细胞在功能性治愈的慢性乙型肝炎患者的免疫学特征研究

通过双荧光染料偶联HBV特异性B细胞,直接体外检测实现功能性治愈的CHB患者B细胞亚群及功能受体的特征,探讨实现功能性治愈的适应性免疫机制。

【方法】纳入NAs经治联合Peg-IFNα治疗的患者（IFN-α组）,共25人;未治疗CHB患者（CHB组）,共7人。根据治疗终点是否发生血清学转换,IFN-α治疗组分为:治愈组（Cure,CR组）:发生HBs Ag血清学转换,伴或不伴HBs Ab产生,HBe Ag（-）;未治愈组（Non-Cure,NCR组）:未发生HBs Ag血清学转换或HBe Ag（+）。分离患者外周血PBMC,将重组HBs Ag、HBc Ag分别与D488、D650染料结合,合成HBV特异性偶联;流式细胞术检测患者外周血总B细胞、HBs Ag/HBc Ag特异性B细胞中c MBC（CD21+、CD27+）、act MBC（CD21-、CD27+）、at MBC（CD21-、CD27-）,Ig M+、Ig G+在不同分组间细胞频数的差异,同时检测活化受体CD38、CD69以及抑制性受体Fc RL5、PD-1在HBs Ag特异性B细胞的表达,使用t检验或方差分析比较组间差异。使用pearson线性回归分析相关性。

【结果】（1）总B细胞及记忆B细胞中各亚组及膜免疫球蛋白表达的比较IFNα治疗组的患者外周血总B细胞中c MBC与CHB组、HC组相比下降（p=0.12,p=0.02）。IFNα治疗组中记忆B细胞c MBC频数与HC组相比下降（p=0.002）,而act MBC、at MBC频数较CHB组及HC组升高（act MBC p=0.03,p=0.011）（at MBC p=0.019,p=0.048）。经过Peg-IFNα序贯联合NAs治疗后,IFNα组患者总B细胞中Ig G+细胞频数低于CHB组（p=0.02）。IFNα组患者记忆B细胞中Ig M+细胞频数低于CHB组、HC组（p=0.12,p=0.12）。

（2）HBV特异性B细胞不同亚组及膜免疫球蛋白比较分析IFNα组中,CR组HBs Ag特异性B细胞中c MBC频数相比NCR组升高（p=0.12）,IFNα组HBs Ag特异性B细胞中c MBC频数与血清HBs Ab水平呈正相关关系（R~2=0.1890,F=0.0299,p=0.03）。IFNα组HBc Ag特异性B细胞中c MBC、at MBC、Ig G+细胞频数显著低于CHB组（p=0.0002,p=0.04,p=0.0009）;Ig M+细胞频数显著高于CHB组（p=0.0009）。所有患者HBc Ag特异性B细胞频数显著高于HBs Ag特异性B细胞（p＜0.001）。

（3）总B细胞及HBs Ag特异性B细胞功能受体及抑制受体表达比较IFNα组总B细胞、HBs Ag特异性B细胞中CD38细胞频数相比CHB组显著升高（p=0.004,p=0.002）;IFNα治疗组HBs Ag特异性B细胞中,CD69 MFI相比CHB组显著升高（p=0.004）;IFNα组中,CR组HBs Ag特异性B细胞中CD69细胞频数较NCR组显著升高（p=0.04）。抑制受体FcRL5、PD-1在不同组间无差异,集中表达于at MBC。

【结论】NAs联合Peg-IFNα治疗使患者外周血总B细胞及记忆B细胞亚群发生改变,发生抗体亚型转换的记忆B细胞增多。HBs Ag特异性B细胞表面活化受体表达增强;这在临床治愈组更显著。HBs Ag特异性B细胞中c MBC频数与血清HBs Ab水平相关,提示这一亚群在功能治愈中具有重要作用。

参考文献

[1]Hepatitis B core-specific memory B cell responses associate with clinical parameters in patients with chronic HBV[J].Thomas Vanwolleghem,Zwier M.A.Groothuismink,Kim Kreefft,Magdeleine Hung,Nikolai Novikov,Andre Boonstra.Journal of Hepatology.2020(1)

[2]Comparative characterization of B cells specific for HBV nucleocapsid and envelope proteins in patients with chronic hepatitis B[J].Nina Le Bert,Loghman Salimzadeh,Upkar Singh Gill,Charles-Antoine Dutertre,Floriana Facchetti,Anthony Tan,Magdeleine Hung,Nikolai Novikov,Pietro Lampertico,Simon Paul Fletcher,Patrick Thomas Francis Kennedy,Antonio Bertoletti.Journal of Hepatology.2020(1)

[3]Hepatitis B virus-induced modulation of liver macrophage function promotes hepatocyte infection[J].Suzanne Faure-Dupuy,Marion Delphin,Ludovic Aillot,Laura Dimier,Fanny Lebossé,Judith Fresquet,Romain Parent,Matthias Sebastian Matter,Michel Rivoire,Nathalie Bendriss-Vermare,Anna Salvetti,Danijela Heide,Lalo Flores,Klaus Klumpp,Angela Lam,Fabien Zoulim,Mathias Heikenw?lder,David Durantel,Julie Lucifora.Journal of Hepatology.2019(6)

[4]Therapeutic strategies for hepatitis B virus infection:towards a cure.[J].Fanning Gregory C,Zoulim Fabien,Hou Jinlin,Bertoletti Antonio.Nature reviews.Drug discovery.2019(11)

[5]李琛.B淋巴细胞在功能性治愈的慢性乙型肝炎患者的免疫学特征[D].福建医科大学,2021.