2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体的应用

背景^[1-3]

2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体是一类可以特异性结合2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)的多克隆抗体，主要用于体外检测2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)的免疫学实验。

2,4-二氯苯氧基乙酸（2,4-D）是用于控制阔叶杂草的常见内吸性除草剂。它是世界上使用最广泛的除草剂，在北美使用次数最多Chemicalbook的是第三种。2,4-D也是重要的合成植物生长素，通常用于实验室进行植物研究，并作为植物细胞培养基（例如MS培养基）的补充。

2,4-二氯苯氧乙酸(除草剂)抗体

2,4-二氯苯氧基乙酸（2,4-D）在500ppm以上高浓度时用于茎叶处理，可在麦、稻、玉米、甘蔗等作物田中防除藜、苋等阔叶杂草及萌芽期禾本科杂草。内吸性。可从根、茎、叶进入植物体内，降解缓慢，故可积累一定浓度，从而干扰植物体内激素平衡，破坏核酸与蛋白质代谢，促进或抑制某些器官生长，使杂草茎叶扭曲、茎基变粗、肿裂等。禾本科作物在其4～5叶期具有较强耐性，是喷药的适期。有时也用于玉米播后苗前的土壤处理，以防除多种单子叶、双子叶杂草。与阿特拉津、扑草净等除草剂混用,或与硫酸铵等酸性肥料混用,可以增加杀草效果。在温度20～28℃时,药效随温度上升而提高,低于20℃则药效降低。2,4-D丁酯在气温高时挥发量大，易扩散飘移，为害邻近双子叶作物和树木，须谨慎使用。2,4-D吸附性强,用过的喷雾器必须充分洗净,以免棉花、蔬菜等敏感作物受其残留微量药剂危害。但对人畜安全。

应用^[4][5]

用于2,4-二氯苯氧乙酸对HepG2细胞葡萄糖代谢的影响及机制研究

2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-Dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D）是世界上使用最广泛的除草剂之一,常被用于蔬菜作物,水果,牧场,草地,森林,水生植物等,甚至在室内尘埃,溪流以及饮用水中,也可检测到2,4-D。因此,其对生物体的影响日益受到重视。该化合物可通过食物链等进入环境和人体,并对其造成伤害。

已经报道的有细胞毒性,生殖毒性和神经毒性,但葡萄糖代谢方面的研究却很少。美国全国健康和营养调查结果显示,2,4-D能影响脂质和葡萄糖的代谢,导致脂质过氧化损伤,参与急性心肌梗死和Ⅱ型糖尿病的发病机制。本研究旨在应用体外模型,深入探讨2,4-D对肝脏葡萄糖代谢的影响及其机制。

方法:HepG2细胞用2,4-D染毒24小时后,采用糖原PAS染色、葡萄糖酶联免疫分析、改良油红O染色等方法,评价2,4-D（0,5μg/ml和50μg/ml）暴露对HepG2细胞的葡萄糖代谢和脂质代谢的影响;采用实时定量PCR方法,检测葡萄糖代谢相关基因和核受体基因的表达;采用蛋白印迹、免疫荧光方法,比较核受体未敲减和核受体敲减组的葡萄糖代谢蛋白的表达差异。

结果:和对照组相比,染毒组（5μg/ml和50μg/ml）细胞内出现了明显的糖原蓄积,未发现脂质蓄积。PCR结果显示,和对照组相比,染毒组葡萄糖代谢相关基因FoxO1、CREB、TORC2的表达明显增加,并且FoxO1和CREB的表达有统计学意义。比较核受体的表达差异,结果显示染毒组PPARβ的增加最为明显,且有统计学意义。

免疫荧光和蛋白印迹的结果显示,和对照组相比,染毒组FoxO1和CREB的表达水平也明显增加。敲减核受体PPARβ后,和对照组相比,染毒组细胞内没有出现糖原蓄积。结论:2,4-D能够影响HepG2细胞的葡萄糖代谢,并且PPARβ受体能够介导2,4-D对HepG2细胞葡萄糖代谢的影响。

参考文献

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[2]Simultaneous determination of acidic pesticides in vegetables and fruits by liquid chromatography—tandem mass spectrometry[J].Shizuka S.Shida,Satoru Nemoto,Rieko Matsuda.Journal of Environmental Science and Health,Part B.2015(3)

[3]Oxidative stress and metabolic perturbations in Escherichia coli exposed to sublethal levels of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid[J].Supriya V.Bhat,Sean C.Booth,Erik A.N.Vantomme,Shirin Afroj,Christopher K.Yost,Tanya E.S.Dahms.Chemosphere.2014

[4]Evaluation of potential endocrine activity of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid using in vitro assays[J].Katherine K.Coady,H.Lynn Kan,Melissa R.Schisler,B.Bhaskar Gollapudi,Barbara Neal,Amy Williams,Matthew J.LeBaron.Toxicology in Vitro.2014(5)

[5]刘慧.2,4-二氯苯氧乙酸对HepG2细胞葡萄糖代谢的影响及机制研究[D].南京医科大学,2017.