原癌基因BCL-6抗体的应用

背景^[1-3]

原癌基因BCL-6抗体是一类可以特异性结合原癌基因BCL-6的多克隆抗体，主要用于体外检测原癌基因BCL-6的免疫学实验。

BCL-6是一种原癌基因，属于抗细胞凋亡家族，目前常作为免疫组化检查中的一项标志物。BCL-6的主要功能是转录抑制作用，进而抑制细胞凋亡。受BCL-6调控的靶基因主要与细胞活化、分化和增生相关。BCL-6位于染色体3q27区域，在细胞分化中扮演着重要角色，许多作用机制涉及BCL-6上调或下调，负反馈调节机制就是其中一个，在细胞反应中遵循负反馈调节机制以维持新陈代谢过程中内环境稳态。BCL-6表达于正常的滤泡生发中心B细胞和其相关的淋巴瘤，很多正常T细胞也可表达BCL-6。

原癌基因BCL-6抗体免疫组化

BCL-6阳性可能预示着机体患有滤泡性淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤以及结节性淋巴细胞为主的Hodgkin淋巴瘤，当脾脏边缘带淋巴瘤向弥漫大B细胞淋巴瘤转变时也可伴有BCL-6阳性表达，血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤中也能检测到BCL-6阳性。

人类原癌基因Bcl-6位于染色体3q27区域，全长26kb，含有10个外显子和7个内含子，Bcl-6广泛分布于细胞活化、分化，细胞周期调控和DNA损伤修复等过程中。

原癌基因BCL-6在细胞分化中扮演着重要角色，许多作用机制涉及Bcl-6上调或下调，负反馈调节机制就是其中一个，在细胞反应中许多转录抑制因子都遵循负反馈调节机制以维持新陈代谢过程中内环境稳态。

应用^[4][5]

用于BCL-6在骨肉瘤组织中的表达的研究

探讨BCL-6在骨肉瘤发生．发展中的作用及其对患者预后的影响。

实验材料l，标本：30例骨肉瘤（无皮质旁骨肉瘤）石蜡标本，选材符合以下条件：l，再次经三名病理专家确认诊断。2，术前未经过化疗和免疫治疗。3，有系统随访记录。4洞期骨软骨瘤石蜡标本20例，作为对照组。2．病例资料：上述骨肉瘤标本对应的病例叨例，男性18例，女性12例，平均年龄20岁。股骨下段12例，腥骨上段8例，股骨上段3例，肢骨上段4例，其它部位3例／ff床分期根据GTGTM分期：IIA：4例，11B：23例，1尺A：3例。术式：广泛切除＋保肢术或截肢术。3．试剂：鼠抗人BCL－6单克隆抗体，二步法免疫试剂均购自福建迈新公司。

实验方法1.石蜡切片，常规HE染色。2．免疫组化染色：石蜡切片常规脱蜡，水化，3％过氧化氢溶液室温10分钟，蒸馏水冲洗，PBS浸泡5分钟，再经TA缓冲液高压抗原修复泊人阮L－6一抗(工作浓度1：so入加链霉菌抗生物素蛋白工作液，室温60分钟，DAB染色，苏木素复染，常规封片，每次实验均用PBS代替BCL－6一抗做阴性对照。

结果判定：以OLYMPUS生物显微镜观察染色切片，高倍镜下观察20个视野，以细胞核（或浆）呈棕黄色至深棕黄色颗粒为阳性细胞，根据切片中阳性细胞的百分比，分为弱阳性和强阳性。

数据处理：采用X’检验，进行统计学处理。

实验结果1．30例骨肉瘤组织中，BCL－6总的阳性表达率40％，BCL－6在骨肉瘤细胞核和胞浆中均有表达，主要位于细胞核内，其中强阳性7例，其中度阳性率7％，弱阳性3例。

2．对照组20例骨软骨瘤BCL－6表达均为阴性。

3．本组病例平均随访53个月，平均无瘤生存20个月，平均生存期35个月，死亡15例人一年生存率83．3％。BCL－6阳性患者术后生存期明显高于阴性患者（P＜O．05）。

参考文献

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[2]Genomic aberrations in squamous cell lung carcinoma related to lymph node or distant metastasis[J].Mirjam C.Boelens,Klaas Kok,Pieter van der Vlies,Gerben van der Vries,Hannie Sietsma,Wim Timens,Dirkje S.Postma,Harry J.M.Groen,Anke van den Berg.Lung Cancer.2009(3)

[3]Genetic variants of miRNA sequences and non-small cell lung cancer survival[J].Hu,Zhibin,Chen,Jiaping,Tian,Tian,Zhou,Xiaoyi,Gu,Haiyong,Xu,Lin,Zeng,Yi,Miao,Ruifen,Jin,Guangfu,Ma,Hongxia,Chen,Yijiang,Shen,Hongbing.Journal of Clinical Investigation.2008(7)

[4]MicroRNA Signature Predicts Survival and Relapse in Lung Cancer[J].Sung-Liang Yu,Hsuan-Yu Chen,Gee-Chen Chang,Chih-Yi Chen,Huei-Wen Chen,Sher Singh,Chiou-Ling Cheng,Chong-Jen Yu,Yung-Chie Lee,Han-Shiang Chen,Te-Jen Su,Ching-Cheng Chiang,Han-Ni Li,Qi-Sheng Hong,Hsin-Yuan Su,Chun-Chieh Chen,Wan-Jiun Chen,Chun-Chi Liu,Wing-Kai Chan,Wei J.Chen,Ker-Chau Li,Jeremy J.W.Chen,Pan-Chyr Yang.Cancer Cell.2008(1)

[5]孙平.BCL-6在骨肉瘤组织中的表达[D].中国医科大学,2002.