细胞色素B5抗体的应用

背景^[1-3]

细胞色素B5抗体是一类可以特异性结合细胞色素B5的多克隆抗体，主要用于体外检测细胞色素B5的免疫学实验。

细胞色素b5存于高等动物内质网膜的一种细胞色素。可从兔肝微粒体中提纯。因为与膜结合，用蛋白酶或表面活性剂处理可以使其溶解。

细胞色素是一类以铁卟啉（或血红素）作为辅基的电子传递蛋白，广泛参与动、植物，酵母以及好氧菌、厌氧光合菌等的氧化还原反应。细胞色素作为电子载体传递电子的方式是通过其血红素辅基中铁原子的还原态(Fe2+)和氧化态（Fe3+）之间的可逆变化。任何一类细胞蛋白（血红素蛋白），在细胞能量转移中起着极为重要的作用。细胞色素可按其吸收的光的波长分为3类，已鉴定出至少30种不同的细胞色素。

细胞色素B5抗体

细胞色素所有需氧生物，不论是细菌或高等动物甚至是人都存在有细胞色素，所有细胞色素在可见光区域都有三个吸收峰，分别称为α、β、γ峰，见表1。各种还原型细胞色素的β峰及γ峰的波长都比较接近，唯有α峰的波长有较大的差别。根据α峰波长的不同，可将动物体内的细胞色素分成a、b、c三族，a族包括a，a3，b族包括bK，bT，b5，P4等，c族包括c，c1。

除细胞色素b及细胞色素P450主要存在于内质网外，动物细胞的细胞色素都存在于线粒体内膜的蛋白质与脂类复合物中。用水提取只能得到细胞色素c，而其他细胞色素仍然固着在线粒体的不溶性颗粒物质上。

应用^[4][5]

用于细胞色素B5B在肝细胞癌组织中表达及对患者预后的评估价值研究

肝癌组织中常伴有多种代谢功能异常,目前已有研究发现肝组织中存在细胞色素B5B（CYB5B）的表达,CYB5B是一种含有一个血红素辅基的小分子蛋白质,其在组织内通过电子转移参与氧化反应等生化转化。本研究旨在探讨CYB5B在肝癌组织中的表达及对患者预后的评估价值。

方法：收集肝癌切除术的122例患者的一般临床资料和肝癌组织及癌旁组织标本,并进行定期随访。采用荧光实时定量PCR实验（Real-time PCR）、蛋白印迹法（Western blot）和免疫组织化学染色（IHC）实验分别检测肝癌组织及癌旁组织中CYB5B m RNA及蛋白质的表达水平。

通过χ~2检验及t检验分析CYB5B表达水平与肝癌病理特征相关指标的关系以及与一般临床资料的关系。并通过Kaplan-Meier、COX风险比例回归模型分析CYB5B的表达水平、肝癌病理特征相关指标及一般临床资料与患者预后的关系。

结果1、肝癌组织和配对癌旁组织标本检测结果（1）荧光实时定量PCR实验（Real-time PCR）检测CYB5B的m RNA表达结果,CYB5B的m RNA在肝癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织。（2）蛋白印迹法（Western blot）检测CYB5B的蛋白表达结果,CYB5B的蛋白在肝癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织。（3）免疫组化方法（IHC）检测肝癌组织和癌旁组织标本中CYB5B的染色结果,CYB5B蛋白主要定位在胞浆中,肝癌组织中CYB5B呈深染色,癌旁组织中CYB5B呈弱染色。

2、CYB5B表达水平与肝癌病理特征及临床资料的相关性结果（1）CYB5B的表达水平与微血管侵犯（P<0.001）、门静脉癌栓（PVTT）（P=0.008）呈正相关,与肿瘤包膜有无（P=0.032）呈负相关;而与肿瘤大小（P=0.146）、肿瘤子灶（P=0.516）无相关性。（2）CYB5B的表达水平与肿瘤TNM分期（P=0.013）、BCLC分期（P=0.001）呈正相关。（3）CYB5B的表达水平与一般临床资料,包括年龄（P=0.224）、性别（P=0.220）、甲胎蛋白（AFP）（P=0.379）、总胆红素（TBIL）（P=0.920）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）（P=0.065）、碱性磷酸酶（ALP）（P=0.905）无相关性。

3、通过Kaplan-Meier、COX风险比例回归模型分析患者预后的结果（1）CYB5B的表达水平与肝癌患者的预后密切相关,CYB5B表达水平与患者总生存时间（OS）和肿瘤复发时间（TTR）呈明显负相关（P<0.05）。（2）单因素分析显示CYB5B高表达、肿瘤大小（>5cm）、甲胎蛋白（AFP）（>400 ng/ml）、TNM分期不良、BCLC分期进展、微血管侵犯及门静脉癌栓（PVTT）与肝癌患者总生存时间（OS）和复发时间（TTR）均显著相关。（3）多因素分析结果表明CYB5B高表达和肿瘤大小（>5cm）是肝癌患者不良预后的危险因素。

参考文献

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[5]韩震.细胞色素B5B在肝细胞癌组织中表达及对患者预后的评估价值[D].大连医科大学,2020.