T淋巴细胞CD1抗体的应用

背景^[1-3]

T淋巴细胞CD1抗体是一类可以特异性结合T淋巴细胞CD1的单克隆抗体，主要用于体外检测T淋巴细胞CD1抗原检测的分化抗原检测实验。

T淋巴细胞分化抗原检测是指利用特定的单克隆抗体检测T淋巴细胞表面分化抗原的方法。T细胞表面有多种特异性抗原，进行T淋巴细胞分化抗原检测有助于某些免疫性疾病、肿瘤等的诊断。

T淋巴细胞CD1免疫组化

CD1在所有胸腺皮质中的胸腺细胞都可以检测到CD1分子的表达，在激活的单核细胞和朗格汉斯细胞中也表达CD1。

操作方法

1.免疫组织化学染色法

（1）免疫荧光显微技术：使荧光抗体与细胞表面的T淋巴细胞分化抗原进行反应，洗涤除去游离的荧光抗体后，在荧光显微镜下观察。

（2）免疫金银染色技术：利用胶体金标记T淋巴细胞分化抗原对应的特异性抗体，通过免疫反应使胶体金颗粒沉积在抗原位置，加入银显影液，用对苯二酚将银离子还原成银原子，被还原的银原子沉积在胶体金颗粒周围形成“银壳”，最终在光镜下就能看到被放大的黑褐色物质。易于辨别阳性物质，而且能检测微量的抗原。

2.流式细胞术

利用荧光素标记的T淋巴细胞分化抗原对应的单克隆抗体做分子探针，在流式细胞仪上检测T淋巴细胞分化抗原的表达，计数T淋巴细胞分化抗原阳性细胞的百分率。

应用^[4][5]

用于树突状细胞特征性抗原CD1a，CD83及HLA-DR在肾癌中的表达及意义研究

通过分析肾透明细胞癌组织及肾癌患者外周血中树突状细胞的免疫状态变化,揭示肾肿瘤免疫逃逸的机制。

方法:本实验选择未经任何非手术治疗的肾透明细胞癌患者石蜡组织标本40例作为实验组,20例因肾结石行肾部分切除的正常肾组织石蜡标本作为对照组,通过免疫组织化学技术标记组织中树突状细胞的特征性抗原CD1a、CD83和HLA-DR,观察正常肾组织及肾透明细胞癌组织中树突状细胞的3种抗原表达的状况,对结果进行统计学分析。同时分别从上述40名肾透明细胞癌患者中选择2006年～2007年住院的20名肾癌患者及20名正常志愿者的外周血中分离、诱导、培养出树突状细胞。通过细胞滴片免疫组化特异性染色鉴定为树突状细胞;通过光镜、倒置显微镜观察树突状细胞形态变化,通过流式细胞仪检测正常人及肾透明细胞癌患者外周血中CD1a及CD83的表达。

结果:（1）所有肾透明细胞癌组织中均有CD1a+DC和CD83+DC,肾透明细胞癌组织CD1a阳性细胞的平均数目为3.2/HPF明显低于正常肾组织中CD1a阳性细胞的平均数目49.2/HPF,两组差异具有统计学意义（P<0.05）;肾透明细胞癌组织CD83阳性细胞的平均数目为4.4/HPF明显低于正常肾组织中CD83阳性细胞的平均数目44.3/HPF,两组差异具有统计学意义（P<0.05）;在肾癌组中有34例癌实质内的DC表达HLA-DR抗原,在正常对照组中有16例表达HLA-DR抗原,肾癌组HLA-DR85%阳性表达率与正常肾组织80%阳性表达率相比无统学意义（P>0.05）。

（2）肾癌患者外周血中树突状细胞表面CD1a和CD83平均表达水平为57.4±1.6和72.1±1.1明显低于正常对照组中CD1a和CD83平均表达水平64.9±1.4和80.6±1.2（P<0.05）。结论:树突状细胞具有趋化性,可以向肿瘤组织聚集,肾癌组织中存在CD1a和CD83,其表达水平均低于正常人。树突状细胞表达HLA-DR抗原在肾癌组和正常对照组中无明显差异。肾癌患者外周血中树突状细胞表面CD1a及CD83表达水平均低于正常人。肾癌患者树突状细胞存在免疫功能缺陷可能是肾肿瘤逃避宿主免疫监视的重要原因之一。

参考文献

[1]CD83:an update on functions and prospects of the maturation marker of dendritic cells[J].Alexander T.Prechtel,Alexander Steinkasserer.Archives of Dermatological Research.2007(2)

[2]Measles Virus Exploits Dendritic Cells to Suppress CD4+T-Cell Proliferation via Expression of Surface Viral Glycoproteins Independently of T-Cell Trans-infection[J].Bertrand Dubois,Pierre Jean Lamy,Karine Chemin,Alain Lachaux,Dominique Kaiserlian.Cellular Immunology.2001(2)

[3]Dendritic cells hold promise for immunotherapy[J].Giampiero Girolomoni,Paola Ricciardi-Castagnoli.Immunology Today.1997(3)

[4]Dendritic cell-based vaccine:a promising approach for cancer immunotherapy.Tarte K,Klein B.Leukemia.1999.

[5]闫东.树突状细胞特征性抗原CD1a，CD83及HLA-DR在肾癌中的表达及意义[D].石河子大学,2008.