脂质过氧化物(LPO)试剂盒的应用

背景^[1-3]

脂质过氧化物(LPO)试剂盒可以在酸性且45℃条件下,脂质过氧化物与显色剂结合,产生稳定的显色基团,在586 nm处有紫外吸收峰,在一定范围内吸光度值与浓度成正比。

在动植生物体内，很多脂类含有不饱和脂肪酸，特别在生物膜的磷脂中，不饱和脂肪酸含量极高。不饱和脂肪酸化学性质很不稳定，很容易受到过氧化作用导致损伤，产生有细胞毒性的脂质过氧化物。近年来研究证明，脂质过氧化化合物能破坏人体细胞正常生理功能与某些疾病的病理过程，如肿瘤、化学中毒、感染、炎症、自身免疫疾病、动脉粥样硬化（AS）及心脑血管疾病，以及衰老等生理过程均有密切联系。

脂质过氧化物(LPO)试剂盒

脂质过氧化被证实是一种细胞损伤机理，作为细胞和组织中氧化应激的一种指标。脂质过氧化物是不稳定的，其可分解形成一系列复杂的混合物，包括反应的羰基混合物。多不饱和的脂肪酸过氧化物分解产生丙二醛Malondialdehyde(MDA)和4-羟基烯烃类(HAE)。LPO、MDA和HAE的测量已经被用作脂质过氧化的一种指标。

产品优点如下：

1、快速简便：全程约2小时，可测50例左右样本。

2、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。

3、再现性好：变异系数CV=1.7%。

4、回收试验：X=97%。

5、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。

6、测试面广：可测动物血清（浆）、组织等。

应用^[4][5]

用于脂质过氧化物在肺癌和动脉粥样硬化性疾病中特异性变化的实验研究

探索临床上治疗肿瘤和动脉硬化性疾病的新的理论和方法。

方法：以临床上确诊的肺癌和合并糖尿病的动脉粥样硬化患者作为血管病变组为研究对象。以病种分为两个实验研究组，正常对照组选择了健康大学生自愿者20名。将实验组分为三组：（1）肺癌组29例，（2）动脉粥样硬化组20例，（3）正常对照组20例。参加实验的人员每人清晨空腹采血16ml加入乙二胺四乙酸（终端浓度为0.05mmol／L）抗凝、抗氧化，用普通离心机在3000转／分条件下离心15分钟，分离提取血浆，在冰箱0℃条件下保存备用。用哈贝尔的重层超速离心法，分离血浆内低密度脂蛋白和高密度脂蛋白。用八木别法，分别检测各组血浆、低密度脂蛋白内的脂质过氧化物含量。用放射免疫法测定各组血浆内超氧化物歧化酶（SOD）的含量。以薄层层析法判定各组脂质过氧化物的峰线位置和大致浓度。制备脂质过氧化物过程当中，加入抗氧化剂观察脂质过氧化物的生成情况并用薄层层析进行观察。

结果：（1）肺癌组的低密度脂蛋白中的脂质过氧化物平均含量9.2±5.1显著高于正常对照组的5.2±4.3 P＜0.05；动脉粥样硬化组的低密度脂蛋白内脂质过氧化物含量11.9±4.0显著高于正常对照组4.6±2.75P＜0.01（表二）；低密度脂蛋白内脂质过氧化物含量在肺癌组与动脉粥样硬化组之间无统计学差异。

（2）在簿层层析中，肺癌组、动脉粥样硬化组与正常对照组的脂质过氧化物的分布与正常对照组不同。肺癌组中脂质过氧化物的斑点位置大致在游离脂肪酸和磷脂之间，动脉粥样硬化组组中的脂质过氧化物斑点位置大致在甘油三脂与游离脂肪酸之间，而正常对照组则无明显斑点出现。

（3）正常对照组、肺癌组和动脉粥样硬化组的超氧化物歧化酶（SOD）)含量分别为328.7±140.53，736.7±366.9，828.6±366.9，结果显示正常对照组与肺癌组和动脉粥样硬化组之间有统计学意义，而肺癌组和动脉粥样硬化组之间无明显差异。

（4）薄层层析显示抗氧化剂可以消除制备脂质氧化物的过程中出现延边大学医学院硕士研究生.毕业论文的过氧化物斑点。

结沦:（1）肺癌和动脉粥样硬化中，浆内低密度脂蛋白当中的脂质过氧化物较正常人明显增多，提示脂质过氧化物与月中瘤及动脉硬化性疾病的发病有密切相关。

（2）薄层层析显示，肿瘤病人浆内脂质过氧化物的分子颗粒的运动速度明显落后于动脉粥样硬化病人的血浆内脂质过氧化物。

（3）抗氧化剂可以有效抑制低密度脂蛋自内脂质过氧化物的生成，提示抗氧化性药物有可能成为治疗肿瘤性疾病和动脉硬化队疾病的有效药物。

参考文献

[1]Expression and cellular localization of low-density lipoprotein receptor-related protein/α2-macroglobulin receptor in human glioblastoma in vivoreceptor in human glioblastoma in vivo[J].Masaaki Yamamoto,Kohichi Ikeda,Kohichi Ohshima,Hitoshi Tsugu,Hideo Kimura,Masamichi Tomonaga.Brain Tumor Pathology.1998(1)

[2]Low-density lipoprotein receptor-related protein in atherosclerosis development:up-regulation of gene expression in patients with coronary obstruction[J].Katrin Handschug,Susanne Schulz,Claudia Schnürer,Sabine K?hler,Katrin Wenzel,Wilhelm Teichmann,C.Gl?ser.Journal of Molecular Medicine.1998(8)

[3]Leukemia cutis with IDH1,DNMT3A and NRAS mutations conferring resistance to venetoclax plus 5-azacytidine in refractory AML[J].Wang JingHan,Ye Xingnong,Fan Cuihua,Zhou Jie,Luo Shuna,Jin Jingxia,Chen Dan,Zheng Yan,Wu Cai,Zhu Xiaoqiong,Jin Jie,Huang Jian.Biomarker Research.2020(1)

[4]Flubendazole,FDA-approved anthelmintic,Elicits Valid Antitumor Effects by Targeting P53 and Promoting Ferroptosis in Castration-resistant Prostate Cancer.[J].Zhou Xumin,Zou Libin,Chen Wenbin,Yang Taowei,Luo Junqi,Wu Kaihui,Shu Fangpeng,Tan Xiao,Yang Yu,Cen Shengren,Li Chuanyin,Mao Xiangming.Pharmacological research.2020(prep)

[5]张帅.脂质过氧化物在肺癌和动脉粥样硬化性疾病中特异性变化的实验研究[D].延边大学,2004.