硫柳汞钠的制备方法及其在生物试剂中的应用

背景及概述^[1]

硫柳汞钠，又名乙基汞硫代水杨酸钠，其具有消毒、抑菌和防腐等作用，广泛用于制药、化妆品等领域，是一种相对高效而毒性比较小的常用试剂。医药上用作外科消毒剂。农业上用作杀菌剂。由硫代水杨酸与氢氧化乙基汞碱溶液反应而得。

制备^[1]

东德专利Ger(East)49843(1966)公开了一种由硫柳汞酸制备硫柳汞钠的方法，其中具体公开了将硫柳汞酸溶于异丙醇中，搅拌下加入等当量的异丙醇钠溶液，并加热到80℃，趁热过滤，冷却结晶，得到硫柳汞钠产品。但是这种方法中没有公开硫柳汞酸的制备以及提纯方法，而硫柳汞酸的纯度会直接影响所制得的硫柳汞钠的纯度。此外，制备过程中使用的异丙醇钠也不容易从反应产物中除干净。

CN200910092504.X 提供一种反应条件容易控制、产率高、时间短、副产物容易分离且纯度高的硫柳汞钠制备方法。所述方法包括下述步骤：

(1)氯乙基汞的制备

以氯化汞和一氯二乙基铝为原料，制备氯乙基汞；

(2)硫柳汞酸的制备

将步骤(1)中得到的氯乙基汞配制成碱液，在搅拌条件下加入到硫代水杨酸钠溶液中，然后加酸将PH值调节到8～2，进行酸析，最后，固液分离得到硫柳汞酸；

(3)硫柳汞钠的制备

使步骤(2)所得硫柳汞酸与含有钠离子的碱性溶液反应，制得硫柳汞钠。

本发明所述方法优选在暗的光线下进行，更优选在避光条件下进行。

根据本发明的方法，其中使用了酸析的方式从氢氧化乙基汞溶液中酸析沉淀出氯乙基汞，并对沉淀物进行多次洗涤，使得得到的原料物质氯乙基汞的纯度达到了98％以上，为后续得到高纯度的硫柳汞钠提供了好的原料基础。进一步地，使用本发明方法制备的氯乙基汞与硫代水杨酸在碱液存在的条件下制备得到的硫柳汞酸其纯度也达到了98％以上。此外，在由硫柳汞酸制备硫柳汞钠的步骤中使用了易挥发的乙醇，使得产物的纯度得到了进一步的控制。

应用 ^[3-4]

一、用于制备一种抗原包被板保护剂

CN201110206807.7提供一种抗原包被板保护剂的配方，该配方合理，保护效果明显，可以用于酶联免疫吸附试验中抗原(或抗体)包被板的处理，延长包被板的使用期限。该抗原包被板保护剂由以下原料按重量百分比配制而成：

制备方法，其步骤是：

A、配制浓度为0.024％的tris水溶液，用盐酸调PH值为7.2～7.6，即为tris- 盐酸缓冲溶液。

B、将tris-盐酸缓冲溶液置磁力搅拌器上室温(20～25℃，以下相同)搅拌， 向溶液中依次加入低聚糖、大分子物质、多元醇、吐温-20、硫柳汞钠。

C、搅拌均匀后，置2～8℃冷藏保存。短期内不用，可分装置-20℃冻存。

与现有技术相比，具有以下优点和效果：

本发明的保护剂原料易于获得，配制成本低，使用方法简便，性状稳定。实践表明，用该抗原包被板保护剂处理的抗原或抗体包被板，保存期可明显延长，提高了酶联免疫吸附试验技术的商业价值。此外，该抗原包被板保护剂同时可以起到封闭效果，无需再用其它封闭液处理和洗涤，简化了抗原或抗体包被板的生产工艺。

二、制备一种抗体保存液

CN201810404684.X提供一种抗体保存液及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种抗体保存液，由如下组份制得：磷酸氢二钠2.3～3.5份、磷酸二氢钠0.23～0.35 份、氯化钠6～12份、牛血清白蛋白5～15份、酪蛋白钠0.8～4.5份、乙二胺四乙酸二钠3～ 4.5份、聚乙二醇4000 5～15份、甘油2～5份、吐温-20 1.5～4.5份、硫柳汞钠0.5～1.5份、庆大霉素0.05～0.1份、水900～1000份，所述保存液pH值为7.0～8.0。

制备方法，包括以下步骤：

步骤1．分别称磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠、聚乙二醇4000、乙二胺四乙酸二钠、硫柳汞钠，加入到900～1000份的纯化水或注射用水或蒸馏水中；

步骤2．充分搅拌，使其完全溶解；

步骤3．加入称量好的酪蛋白钠，均速搅拌至完全溶解；

步骤4．加入称量好的牛血清白蛋白，均速搅拌至完全溶解；

步骤5．分别加入量取好的甘油 、吐温-20、庆大霉素，均速搅拌均匀；

步骤6．调节pH值至7.0～8.0；

步骤7．根据需要分装至相应容器中备用。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、该抗体保存液可以维持多种抗体分子的稳定性，程度地保持抗体的生物活性，延长抗体分子的保存期，便于多种实验或工业生产中不同用途的使用。

2、该抗体保存液所用组分均为科学实验或相关医药生产领域常见的试剂，容易采购、成本不高，而维持抗体活性的作用突出，与常用的含牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液相比，有明显优势。

主要参考资料

[1] CN200910092504.X 一种制备硫柳汞钠的方法

[2] CN201110206807.7 一种抗原包被板保护剂及制备方法

[3] CN201810404684.X 一种抗体保存液及其制备方法