Hsp20 Rabbit Monoclonal Antibody

背景^[1][2]

热休克蛋白（heat shock protein, HSP）是在各种应激因素特别是高温环境因素的诱导下产生的一类蛋白质，广泛存在于人、动物、微生物和植物的细胞中，能提高细胞对抗各种损伤因素的能力，并促进细胞对各种刺激所造成的损伤进行自身修复，具有重要的生物学功能，并与肿瘤细胞的增殖密切相关，HSPs- 肽复合物通过活化体内多个CTL 克隆，可望特异杀伤同一种肿瘤内所有肿瘤细胞，打破免疫耐受，消灭残存瘤组织，克服目前肿瘤中难以解决的抗原多变性及细胞异质性等困难。

根据其分子量的不同，可分为HSP110，HSP90，HSP70，HSP60 及小分子热休克蛋白亚家族。其中小分子热休克蛋白（small heat shock protein, sHSP）几乎存在于所有生物体中，具有保守的α 晶体蛋白结构域，在细胞内发挥着不同的功能。HSP20 分子量为20 kD，属于小分子热休克蛋白，主要分布在骨骼肌、心肌、血管和胃肠平滑肌、膀胱、脑等组织中。

HSP20 在脑组织中的含量约为每毫克细胞蛋白3 ～ 6 ng，其在生理条件下可于多种脑细胞的胞浆中极少量表达，在缺血等病理状态下则被大量激活产生并可有部分亚群分移向胞核，其余大部分仍停留在胞浆。单克隆抗体技术起源于Kohler等创建的体外鼠源杂交瘤技术。经多年研究，鼠单抗已从单纯的生物实验室科研及临床诊断发展到治疗性抗体药物。

但鼠单抗的主要缺陷是小鼠免疫系统不能识别某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠单抗的亲和性不如兔来源抗体的亲和性高。然而由于没有发现兔源性的浆细胞瘤及病毒体外转染兔B细胞的技术困难，直到1995年在c-myc/v-abl转基因兔身上成功地获得了兔浆细胞瘤细胞系，得到了稳定的兔-兔杂交瘤，才使兔单克隆抗体技术有了突破性进展。近年兔单克隆抗体技术日臻完善，目前商品化的兔单抗已达数千种。

Hsp20兔单克隆抗体适用于Western blot、Immunoprecipitation、免疫荧光、免疫细胞化学、Immunocytochemistry、Flow Cytometry、Enzyme-linked Immunosorbent检测、ChromatinImmunoprecipitation 检测等，Hsp20兔单克隆抗体100 µl 浓度为 0.544 mg/ml，40 µl 浓度为 0.544 mg/ml，10 µl 浓度为 0.544 mg/ml。

Hsp20 兔单克隆抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。如果Hsp20兔单克隆抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。

应用^[1]

1. 在生物标记物开发中的应用

兔单克隆抗体包括Hsp20兔单克隆抗体广泛用于生命科学研究的各个领域，尤其在免疫组织化学以及检测蛋白的转译后修饰方面具有独特优势。至今已有100多种兔单克隆抗体开发用于癌症的IHC临床诊断与研究，其中最具代表性的就是Her2和c-Kit的IHC诊断试剂盒。在蛋白修饰研究领域，如蛋白的磷酸化，在与疾病相关的蛋白质信号通路中起到了至关重要的作用，使用磷酸化蛋白的兔单克隆抗体可以非常清楚地显示蛋白的磷酸化程度。目前已有200多种磷酸化特异性的兔单克隆抗体面世。

2. 在治疗抗体药物开发中的应用

临床使用的大多数治疗用抗体均需经体外亲和力成熟这一步骤，以提高抗体的亲和力。这一过程常需8至12个月，最终亲和力在纳摩尔级(10-9 mol/L)。兔单抗不需使用体外亲和力成熟，就能达到10-11至10-13 mol/L。这种高亲和力不仅减少抗体的临床使用量，还能减少由于使用大量抗体带来的副作用。但这种高亲和力的优势还需在动物和临床试验中进一步证实。

另外，与鼠单抗的人源化相比，兔单克隆抗体的人源化更容易。因为，兔单克隆抗体主要由一种重链及轻链基因构成，通过分析大量的兔单克隆抗体序列发现，兔与人的抗体同源性更高，约60%～76%，而小鼠与人的抗体同源性略低，为57%～72%，说明用兔单克隆抗体开发药物前景更广阔。

主要参考资料

[1] 李婷婷, 崔慧斐. 兔单克隆抗体的发展及应用前景[J]. 食品与药品, 2012, 14(9): 373-376.

[2] 吴大鹏, 胡治平, 杨和平. 热休克蛋白 20 与高尔基体在沙鼠前脑缺血再灌注后的变化及相关性[D]. 中华医学会, 2012.