磷酸化CDC37 (Ser13)兔单克隆抗体

背景^[1][2]

热休克蛋白（heat shock protein，HSP）是在各种应激因素特别是高温环境因素的诱导下产生的一类蛋白质，HSPs-肽复合物通过活化体内多个CTL 克隆，可望特异杀伤同一种肿瘤内所有肿瘤细胞，打破免疫耐受，消灭残存瘤组织，克服目前肿瘤中难以解决的抗原多变性及细胞异质性等困难。根据其分子量的不同，可分为HSP110，HSP90，HSP70，HSP60 及小分子热休克蛋白亚家族。

CDC37作为热休克蛋白90(HSP90)的一种重要的辅助分子伴侣能够特异性地与蛋白激酶结合，防止新合成的蛋白激酶的错误折叠和降解。研究发现，CDC37在活跃增殖的组织中的表达水平明显高于正常组织，而且CDC37的过表达能够促进正常前列腺上皮细胞增殖。

CDC37在肝癌组织中的表达明显高于癌周组织和正常肝组织，肝癌细胞系中CDC37基因表达的沉默会明显抑制其在裸鼠中肿瘤模型的形成和生长，在肝癌的形成过程中CDC37的高表达能够弱化P16对细胞生长的抑制 ，提示CDC37表达的上调在HCC发生过程具有重要作用。单克隆抗体技术起源于Kohler等创建的体外鼠源杂交瘤技术。

经多年研究，鼠单抗已从单纯的生物实验室科研及临床诊断发展到治疗性抗体药物。但鼠单抗的主要缺陷是小鼠免疫系统不能识别某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠单抗的亲和性不如兔来源抗体的亲和性高。然而由于没有发现兔源性的浆细胞瘤及病毒体外转染兔B细胞的技术困难，直到1995年在c-myc/v-abl转基因兔身上成功地获得了兔浆细胞瘤细胞系，得到了稳定的兔-兔杂交瘤，才使兔单克隆抗体技术有了突破性进展。近年兔单克隆抗体技术日臻完善，目前商品化的兔单抗已达数千种。

磷酸化CDC37 (Ser13)兔单克隆抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。 

如果磷酸化CDC37 (Ser13)兔单克隆抗体用于Western blot (WB，1:1000 - 1:10000)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC，1:10 - 1:100)、Flo (1:10 - 1:100)，IHC-P (1:250 - 1:500)，IP (1:10 - 1:100)，IHC - Paraffin (1:250 - 1:500)，Flow Cytome try (1:10- 1:100)等实验，请注意回收使用过的稀释抗体。回收的磷酸化CDC37 (Ser13)兔单克隆抗体通常至少可以重复使用5-10次。

稀释后的磷酸化CDC37 (Ser13)兔单克隆抗体，包括已经使用过的稀释抗体，请4℃保存。 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。 

主要参考资料

[1] 李婷婷，崔慧斐. 兔单克隆抗体的发展及应用前景[J]. 食品与药品，2012，14(9): 373-376.

[2] HBV复制及不同基因表达不影响CDC37水平