秦皮甲素的制备方法及应用

背景及概述^[1][2]

秦皮为常用中药，通常来源于木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophyllaHanee、白蜡树Fraxinus chinensis Roxb、尖叶白蜡树 Fraxinusszaboana Lingelsh.或宿柱白蜡树Fraxinus stylosaLing的干燥枝皮或干皮。中医理论认为，秦皮具有清热燥湿、收涩、明目等功效，常用于治疗热痢、 泄泻、赤白带下、目赤肿痛、目生翳膜等症。现代研究表明，秦皮具有抗病原微生物、抗炎、利尿、抗凝和抗过敏等作用。秦皮的主要成分为香豆素类，包括秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮素等，其中秦皮甲素含量最高，约1％。

制备^[1]

目前，秦皮甲素的制备采用95％的乙醇回流提取方法，该包括将提取液浓缩至无醇味后，用乙酸乙酯进行萃取，以除去秦皮乙素。所得溶液再进行浓缩析出秦皮甲素晶体。在该方法，要使用95％的乙醇和乙酸乙酯，成本高，并且萃取过程容易乳化，操作较麻烦。而且，浓缩步骤存在很大困难，因为溶液体积过小时，粘度太大，很难析出晶体。

CN200510030722.2在于提供一种高纯度秦皮甲素的制备方法，该方法操作简便、成本低、产率高，可用于工业化生产，而且本发明的方法对于环境和人体无害。本发明提供了一种秦皮甲素的制备方法，所述方法包括从秦皮中提取秦皮甲素、分离、浓缩和结晶步骤。

应用 ^[2-3]

为了发挥环磷酰胺的抗肿瘤功效，同时降低其毒副作用，CN201410362088.1创造性地降低环磷酰胺的用量，并将其与秦皮甲素联合应用，意外发现二者用药后不仅具有协同增效的抗肿瘤效果，而且秦皮甲素具有减轻环磷酰胺所致的免疫抑制的功效。基于此研究，CN201410362088.1提供一种含有秦皮甲素的抗肿瘤药物组合物。具体地，本发明的目的是这样实现的：一种含有秦皮甲素的抗肿瘤药物组合物，其中所述的药物组合物中活性成分由秦皮甲素和环磷酰胺组成。优选地，如上所述的抗肿瘤药物组合物，其中所述的活性成分中秦皮甲素和环磷酰胺的重量用量比为0.5-5：1。本发明所述的抗肿瘤药物组合物通过注射给药后即可发挥药效，因此将其制备为注射剂，所述的注射剂包括注射液、冻干粉针剂。

以秦皮甲素和低剂量的环磷酰胺为研究对象，腋下接种H22肉瘤的昆明种小鼠为载体，腹腔注射给药，结果发现二者联用后不仅具有协同抗肿瘤效果，而且降低了环磷酰胺在免疫抑制方面的毒副作用。因此，本发明还提供一种制药用途，即：秦皮甲素和环磷酰胺组成的活性成分在制备抗肿瘤的药物中的应用；以及：秦皮甲素在制备减轻环磷酰胺所致免疫抑制的药物中的应用。与现有技术相比，本发明涉及的药物组合物具有如下优点和显著进步：秦皮甲素和环磷酰胺联用后具有协同抗肿瘤效果，以及提高肿瘤患者免疫功能的效果，同时，秦皮甲素为天然提取产物，毒性非常小，副作用和不良反应率低；环磷酰胺用量仅仅为常规用量的二分之一，因此费用、副作用和不良反应率也较低。

秦皮甲素在治疗防治骨质疏松方面，在有效剂量内对RAW264.7细胞没有明显的细胞毒作用，能够抑制RANKL诱导的NF-κB转录活化效应，抑制RANKL诱导的RAW264.7细胞向破骨细胞的形成。与此同时，可以降低TRAP、MMP9、CathepsinK、v-ATPased2等破骨细胞分化特异基因的表达，抑制骨吸收，最终起到防治骨质疏松的作用。由于秦皮甲素为纯天然物质，用药安全，毒副作用小，可用于骨质疏松的防治。

主要参考资料

[1] CN200510030722.2 高纯度秦皮甲素及其制备方法

[2] CN201410362088.1 一种含有秦皮甲素的抗肿瘤药物组合物

[3]CN201510441342.1 秦皮甲素在制备防治骨质疏松药物中的应用