Caspase-2兔单抗

背景^[1][2]

单克隆抗体技术起源于Kohler等创建的体外鼠源杂交瘤技术。经多年研究，鼠单抗已从单纯的生物实验室科研及临床诊断发展到治疗性抗体药物。但鼠单抗的主要缺陷是小鼠免疫系统不能识别某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠单抗的亲和性不如兔来源抗体的亲和性高。然而由于没有发现兔源性的浆细胞瘤及病毒体外转染兔B细胞的技术困难，直到1995年在c-myc/v-abl转基因兔身上成功地获得了兔浆细胞瘤细胞系，得到了稳定的兔-兔杂交瘤，才使兔单克隆抗体技术有了突破性进展。

近年兔单克隆抗体技术日臻完善，目前商品化的兔单抗已达数千种。Caspase 为天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶，是一类进化上高度保守的半胱氨酸蛋白酶家族。Caspase 依赖的凋亡途径是细胞程序性死亡的一种重要方式，其中Caspase-2 是最保守的Caspase家族成员之一。文献报道Caspase-2 位于Caspase-3 的上游，在凋亡的发生中其先于Caspase-3 被激活。Caspase-2 为凋亡启动因子并促使细胞发生凋亡，当Caspase-2 的表达下调可抑制细胞凋亡。Caspase-2 在凋亡中发挥复杂而独特的作用。

Caspase-2m RNA 存在两种剪接变异体，分别编码Caspase-2L 和Caspase-2s 两种蛋白，前者分子量大，后者分子量小，它们对凋亡的作用正好相反，Caspase-2L 过量表达可促进凋亡，而Caspase-2S 过量表达则抑制凋亡。其中Caspase-2L 在大多数组织中表达占优势。

这两种m RN A 是由于对外显子9 的不同剪切方式而形成的，Caspase-2L 含有外显子9，而Caspase-2S 不含。这两种形式的Caspase-2在细胞内表达的平衡对于细胞是否存活至关重要。Caspase-2兔单克隆抗体主要用于分子印迹分析，适用于人、大鼠及小鼠。Caspase-2兔单克隆抗体100 µl 浓度为 2.638 mg/ml40 µl 浓度为 2.638 mg/ml批次浓度范围 10 µl 浓度为 2.383 - 2.638 mg/ml。

应用

1. 在生物标记物开发中的应用

兔单克隆抗体包括Caspase-2兔单克隆抗体广泛用于生命科学研究的各个领域，尤其在免疫组织化学以及检测蛋白的转译后修饰方面具有独特优势。至今已有100多种兔单克隆抗体开发用于癌症的IHC临床诊断与研究，其中最具代表性的就是Her2和c-Kit的IHC诊断试剂盒。在蛋白修饰研究领域，如蛋白的磷酸化，在与疾病相关的蛋白质信号通路中起到了至关重要的作用，使用磷酸化蛋白的兔单克隆抗体可以非常清楚地显示蛋白的磷酸化程度。目前已有200多种磷酸化特异性的兔单克隆抗体面世。

2. 在治疗抗体药物开发中的应用

临床使用的大多数治疗用抗体均需经体外亲和力成熟这一步骤，以提高抗体的亲和力。这一过程常需8至12个月，最终亲和力在纳摩尔级(10-9 mol/L)。兔单抗不需使用体外亲和力成熟，就能达到10-11至10-13 mol/L。这种高亲和力不仅减少抗体的临床使用量，还能减少由于使用大量抗体带来的副作用。但这种高亲和力的优势还需在动物和临床试验中进一步证实。

另外，与鼠单抗的人源化相比，兔单克隆抗体的人源化更容易。因为，兔单克隆抗体主要由一种重链及轻链基因构成，通过分析大量的兔单克隆抗体序列发现，兔与人的抗体同源性更高，约60%～76%，而小鼠与人的抗体同源性略低，为57%～72%，说明用兔单克隆抗体开发药物前景更广阔。

主要参考资料

[1] 李婷婷，崔慧斐. 兔单克隆抗体的发展及应用前景[J]. 食品与药品，2012，14(9)： 373-376.

[2] 刘天会, 陈瑞, 孙志贤. caspase-2: 一种特殊的半胱天冬酶[J]. 国外医学: 遗传学分册, 2004, 27(5): 268-270.