NBC抑制剂(S0859)的制备

背景及概述

NBC1是碳酸氢盐载体超家族的成员之一，属于膜整合协同转运蛋白。几乎所有组织器官都表达NBC家族的某一成员。NBC1在维持细胞容积、离子转运、介导细胞迁移和调节细胞内外酸碱平衡等生理过程中发挥相应作用。1997年，个NBC1被Romero从美西螈属动物肾脏首次克隆获得，之后陆续在胰腺，心和眼等克隆得到该载体。课题组前期研究结果显示NBC1在大鼠出生后胰腺重塑旺盛期特异高表达，而在凋亡旺盛期表达最低，提示NBC1可能参与出生后胰腺发育及胰岛结构重塑[1]。预测的NBCe1拓扑结构示意图见下图。NBC抑制剂(S0859)中文名称：2-氯-N-[[2'-[(氰基氨基)磺酰基][1,1'-联苯]-4-基]甲基]-N-[(4-甲基苯基)甲基]苯甲酰胺，英文名称：2-chloro-N-[[4-[2-(cyanosulfamoyl)phenyl]phenyl]methyl]-N-[(4-methylphenyl)methyl]benzamide，CAS号：1019331-10-2，分子式：C29H24ClN3O3S，分子量：530.037。是哺乳动物心脏中碳酸氢钠共转运蛋白的选择性抑制剂。S0859是一种选择性的，高亲和力的Na+/HCO3-共转运体(NBC)抑制剂，可逆性地抑制NBC介导的细胞内pH(pHi)恢复(Ki=1.7μM，完全抑制在30μM)。使用NBC抑制剂S0859显著提高了半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3活性，并增加了凋亡数量。S0859对于探索转运蛋白在心脏和其他组织中的功能作用很重要。

图1 预测的NBCe1拓扑结构示意图

制备

以N-(4-甲基苯基)甲基-2-氯苯甲酰胺及碘代2'-(氰基氨基)磺酰基]-联苯为起始原料，制备NBC抑制剂(S0859)[1]。

在2000mL三口瓶中加入150mL冰醋酸、800mL水和80mL浓硫酸，快速搅拌下，加入N-(4-甲基苯基)甲基-2-氯苯甲酰胺、碘代2'-(氰基氨基)磺酰基]-联苯溶于50mL冰醋酸溶液。调整溶液温度在20℃左右并剧烈搅拌的同时，滴加1．5g重铬酸钾的20mL水溶液，此时溶液由无色变为绿色。加毕，继续搅拌约10min，加入2g亚硫酸氢钠，充分搅拌。过滤，得墨绿色泥状物，将其加入冷的饱和亚硫酸氢钠溶液中，充分搅拌至泥状物完全分散后，加热至沸腾，趁热过滤，热水洗涤，充分干燥后得浅棕色粉状固体。将该粉末用150mL约70℃的二甲苯萃取两次，合并萃取液，自然冷却，析出晶体，过滤，用乙醇洗涤至洗出液不浑浊，真空干燥得NBC抑制剂(S0859)。

参考文献

[1] Romero MF, Fulton CM, Boron WF. The SLC4 family of HCO 3 – transporters. Pflugers Arch 2004; 447: 495–509.