RAB5抗体

背景及概述

Rab5抗体用经过适当修饰的人工合成的人Rab5的一段多肽(aa2-14)作为抗原制备而成的抗Rab5小鼠单克隆抗体。克隆号为Rab5-65。Rab5抗体识别的是总Rab5(total Rab5)，可以检测内源性的Rab5。Rab5是小Rab GTPases的Ras超家族成员。Rab5主要定位于早期内体(early endosome)，在细胞质膜上也有分布，在内吞作用早期的囊泡运输过程中起关键调节作用。Rab5 GTP和Rab5 GDP之间的构像改变是内吞过程多个步骤的限速因素。Rab5与GDP结合处于非激活状态，与TP结合处于激活状态。这两种状态之间的转换则由GEPs(GEP/GTP exchange factors)、GDIs(GDP-dissociationi inhibitors)和GAPs(GTPase-activating proteins)所调控。Rab通过与几种Rab5特异性的效应蛋白相互作用而发挥其功能。这些效应蛋白在内体(endosome)的特定Rab结构域(Rab domain)和Rab5形成复合物，促进Rab5载运目标货物(Rab5-cargo targets)在内体和质膜之间的循环利用。Rab5常被用作早期内体的分子标记(early endosome marker)。

使用方法

Rab5抗体使用时配套使用Western一抗稀释液，可以用于Western检测时的一抗稀释。抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整)：

保存条件

Rab5抗体-20℃保存，Western一抗稀释液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存，长期不使用可以考虑-20℃保存，但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。

注意事项

在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。