3-磷酸甘油醛脱氢酶的介绍

背景及概述^[1]

3-磷酸甘油醛脱氢酶，英文名(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase， GAPD)。3-磷酸甘油醛脱氢酶，它可以催化3-磷酸甘油醛氧化(脱氢)和磷酸化，生成1，3-二磷酸甘油酸，是糖代谢的中心环节，故对糖代谢起着重要的作用。3-磷酸甘油醛脱氢酶广布于人体各组织器官，脂肪组织含量较低，肺含酶量约为脂肪组织的10倍，肝、心含量相近，约为脂肪组织的30倍，以骨骼肌、红细胞和肾中的含量最为丰富。急性肝炎、酒精性肝病、肝硬变等可致血清GAPD总活性升高。慢性肾盂肾炎、多发性骨髓病、肺炎、肺气肿等病人血清 GAPDA活性呈不同程度的升高。3-磷酸甘油醛脱氢酶的应用前景十分广阔，它是糖代谢的中心环节，对糖代谢起着重要的作用，而对于体内缺乏此酶，糖代谢有问题的病人，通过食用含有此酶的药物，可以使病情得以缓解，治疗。该酶还分布于人体各组织器官故通过对3-磷酸甘油醛脱氢酶的活性检测就可以推断是否患有此类病，对于疾病的预防有着很大作用。

制备^[1]

CN201711376257.7提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体。得到了来源于细菌中的3-磷酸甘油醛脱氢酶，而且该3-磷酸甘油醛脱氢酶具有低温酶的特性，制备得到3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体，能够准确检测3-磷酸甘油醛脱氢酶。本发明的目的之一是提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶的氨基酸序列；所述3-磷酸甘 油醛脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的目的之二是提供一种编码3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的碱基序列；所述3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的目的之三是提供一种3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体制备方法。包括以下步骤：1)以氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的3-磷酸甘油醛脱氢酶为抗原，免疫小鼠制备抗血清；2)纯化抗血清得到3-磷酸甘油醛脱氢酶的多克隆抗体。进一步地，所述3-磷酸甘油醛脱氢酶的制备方法为：1.1)利用PCR技术扩增SEQ ID NO.2所示的碱基序列；1.2)将SEQ ID NO.2所示的碱基序列克隆入载体质粒中，构建3-磷酸甘油醛脱氢 酶的表达载体；1.3)将表达载体转化入大肠杆菌感受态菌体中得到重组菌体，依次经扩大培养、诱导表达、收集菌体、破碎菌体和纯化蛋白过程得到3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白。图3为重组菌株Ecoli BL21-pET21a-GPR表达3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白的聚丙烯 酰胺凝胶电泳鉴定图；其中M泳道为protein marker；1号泳道为3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白；

主要参考资料

[1] CN201711376257.7 3-磷酸甘油醛脱氢酶及其多克隆抗体