木犀草苷的制备

背景及概述^[1][2]

木犀草苷是一种天然的黄酮类物质，在植物中分布广泛，在多种药物中也含有木犀草苷，如双黄连口服液，清咽含片，抗感胶囊等。但这些药物中都是含有多种有效成分，单一含有木犀草苷的药物现在市面上没有。木犀草苷是一种存在于天然植物中的一种黄酮苷类化合物，具有镇咳和祛痰作用。木犀草苷有较强的呼吸道杀菌作用，它是新疆特有药材青兰中治疗气管炎的主要有效成分。降低 胆固醇在动脉粥样硬化中的作用，增强毛细血管的舒张作用。

木犀草苷邻二酚羟基的特殊结构赋予了它抗氧化、抗肿瘤、抗感染、解热抗炎等药理活性，近年来研究表明，木犀草苷具有多种药理活性，对呼吸系统、心血管系统、中枢神经系统疾病均有不同程度的治疗作用，如降低胆固醇、增强毛细血管舒张、杀菌，以及抗病毒、抗肿瘤、抗氧化等，临床主要用于止咳、祛痰、消炎、治疗心血管等疾病。由于中药金银花的化学成分复杂，使得木犀草苷的提取和分离存在较大困难

结构

生物活性及应用^[3]

1. 呼吸系统保护作用

木犀草苷化学名为木犀草素-7-O -葡萄糖苷(Luteolin-7-O -glucoside)，其苷兀为木犀草素，因其邻二酚羟基特殊的化学结构，使其具有清除自由基的抗氧化活性，对枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、啤酒酵母等在不同浓度下有抑菌活性，且能对抗呼吸道病毒、副流感3 型病毒和流感A 型病毒，因此具有较强的呼吸道杀菌作用，临床上已验证对治疗喘、痰症状有疗效。

采用细胞并变法进行了抗呼吸道病毒感染的研究，结果发现木犀草苷具有很强的抗呼吸道合胞体病毒的活性，其半抑制浓度(IC50)为5 . 2滋g/m L ，治疗指数为48.1，高于阳性对照药病毒唑，另外木犀草苷具有一定强度的抗副流感3型病毒的活性，其治疗指数为6 .0 。

2. 心血管保护作用

木犀草苷的抗氧化活性能够减轻阿霉素诱导产生的自由基对心肌细胞的损伤。木犀草苷通过与血栓素A2 受体结合抑制血小板功能，并通过监测P I3K活性抑制血管内皮生长因子诱导的血管生成，可能成为预防和治疗动脉粥样硬化的潜在治疗剂。木犀草苷能明显降低乳酸脱氢酶(LDH )的释放，上调抗凋亡蛋白FGFR 2和LIF 表达，激活PI3K/Akt途径，同时增加BAD 磷酸化Bax ，缩小Bcl-2 的比例，减少梗死面积，降低心肌细胞凋亡率和心律失常发生率，从而改善心脏功能。

3. 抑菌、抗炎、抗病毒作用

通过测定铜绿假单胞菌质控菌株和多耐药菌株的体外抑菌作用，初步确定了木犀草素具有明显的抑菌作用。金银花中木犀草苷影响大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌细胞内的核酸，使得DNA 复制和RNA 合成无法完成，影响蛋白质的合成和表达，从而起到抑菌的作用，还可以降低肝纤维化程度，并具有抗炎的功效，同时能够抑制单纯疱疹病毒性角膜炎、流感病毒性肺炎、甲型流感病毒、猪繁与呼吸综合征病毒、新城疫病毒、呼吸道合胞病毒、流行性感冒和人巨细胞病毒等，从而达到抗病毒的功效。

4. 抗肿瘤作用

目前，木犀草苷在抗肿瘤方面的研究较为普遍和广泛。木犀草苷可以通过抑制SGLT1 的葡萄糖转运，从而起到抗癌作用，也可以通过抑制细胞内某些激酶的活性间接地抑制肿瘤细胞增殖。有文献报道，通过热稳定实验，评价木犀草苷对1 4株癌细胞的体外增殖抑制作用，发现木犀草苷可通过下调Hsp9 0 的客户蛋白Raf- 1、HER 2 的表达，抑制H sp90 的活性，选择性地抑制非小细胞肺癌的增殖，诱导非小细胞肺癌凋亡，从而发挥抗肿瘤的作用。

0.1% DMSO 溶液中，木犀草苷的抑癌性强于木犀草素，1.15x 10< mol/L 木犀草苷水溶液的抑癌效果是木犀草苷0.1% DMSO 溶液的1.87倍，可能原因是木犀草苷易溶于水的性质增强了木犀草苷与葡萄糖转运体的亲和性。研究表明，给药木犀草苷使HeLa 和SW 2 0 细胞内的磷酸化组蛋白含量降低影响极光激酶B 的活性，从而抑制HeLa 和SW20 细胞增殖，起到抗肿瘤的作用。

5. 抗皮肤老化、抗局部缺血作用

木犀草苷降低胶原蛋白的分解和减少纤维细胞中MMP-1 的合成，可能成为一种有效的抗皮肤老化治疗剂。不同浓度木犀草素增加皮肤成纤维细胞中I型和芋型胶原蛋白含量，对MM P- 1 蛋白表达有显著的抑制作用，并成浓度梯度依赖性。在探讨木犀草苷对心肌功能的影响中，发现木犀草苷在改进抗缺血特性相关缺血边缘心肌灌注部位的过程中，具有抗局部缺血的功效，可能是因为其抗氧化性质而发挥的药效。

制备^[3]

1. 溶剂提取法

由于木犀草苷可溶于热水、热甲醇及乙醇的性质大多采用水或醇溶液作为溶剂的提取方法。比较水回流和7 0 % 乙醇超声法对木犀草苷含量的影响，结合高效液相色谱法(HPLC )对两种提取样进行了含量测定，结果表明两种提取方法中木犀草苷的含量分别为0.01%和0.061%，且70 % 乙醇溶液提取的木犀草苷含量是水提法的6 .1 倍，所以醇溶液的提取方法略优于水提取方法。

2. 超声提取法

回流提取一般都在较高的温度下进行，容易影响物质有效成分的活性或导致有效成分的损失，2005版药典规定以超声法作为木犀草苷的提取方法。嗵过正交试验优化比较加热回流与超声两种醇提方法对金银花药材中绿原酸和木犀草苷的影响，结果表明以木犀草苷转移率为指标，超声法略优于回流法。

3. 闪式提取法

考虑到超声和回流方法耗时较长，提出一种快速的生物活性成分提取方法一闪式提取法。分别以绿原酸和木犀草苷得率为指标，比较回流法、超声法及闪式提取法，结果表明，闪式提取法木犀草苷含量约为回流法的2 倍，超声法略高于回流法，且分别以绿原酸、木犀草苷含量为指标，确定单独以木犀草苷或综合考虑绿原酸和木樨草苷含量两个指标时的提取工艺为15倍量6 0 % 乙醇提取1 min。

比较闪式提取法和超声提取法分别提取金银花及其叶中的绿原酸和木犀草苷的含量，建立高效液相色谱-二极管阵列检测器分析方法进行评价，结果表明闪式提取3 min ，金银花及其叶中绿原酸和木犀草苷的提取率均略高于超声提取法。

4. 其他方法

除以上提取方法外，也有文献报道过其他提取方法。如超高压提取法、超临界流体萃取法同，而且2005版药典规定对金银花中木犀草苷进行含量测定时，采用超声波辅助提取法制备供试品溶液，经HPLC测定含量。

主要参考资料

[1]  姚德坤;张殿臣;苏学辉;姚德利;姚航;黄运生;吴海龙;孟祥敏. 一种从牛膝藤中制备木犀草苷的方法. CN201310694944.9，申请日20131213

[2] 杨丽军, 王丹丹, 张允菲, 等. 金银花中木犀草苷的研究进展[J]. 中国医药导报, 2017, 14(24): 58-61.

[3] 何玲, 孙桂波, 孙潇, 等. 木犀草苷对阿霉素诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用[J]. 中国药理学通报, 2012, 28(9): 1229-1234.