营养肉汤培养基的应用

背景^[1-3]

营养肉汤培养基用于一般细菌培养、复壮、增菌等,也可用于消毒剂定性消毒效果测定的基础培养基。

营养肉汤培养基是最常用的基础培养基，它可作为一些特殊培养基的基本成分，再根据某种微生物的特殊要求，在基础培养基中添加所需营养物质。

基础培养基：含有细菌生长繁殖所需的基本营养物质，可供大多数细菌生长。在牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐，调节pH7.2～7.6，经灭菌处理后，即为基础液体培养基；如再加入0.3%～0.5%的琼脂，则为基础半固体培养基；加入1%～2%的琼脂，则为基础固体培养基。

营养肉汤培养基

检验原理:胨和牛肉浸出粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压。

配方成分(每升)：蛋白胨10g；牛肉膏粉3g；氯化钠5g；最终pH 7.2±0.2

使用方法

1、称取营养肉汤(NB)药典瓶装颗粒培养基18.0g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶或试管，121℃高压灭菌15min，待冷至常温，备用。

2、移取菌株至营养肉汤中。

3、30～35℃培养18～24h。

4、观察结果。

应用^[4][5]

用于基于代谢组学和基因组信息的食源性致病菌差异代谢物研究

基于代谢组学研究方法,结合基因组信息,利用气相色谱质谱联用技术和顶空固相微萃取技术,选取以金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,ATCC 6538）、沙门氏菌（Salmonella,ATCC 14028）和黄曲霉菌（Aspergillus flavus,CGMCC 3.6431）为代表的致病菌在培养基、牛奶、酱牛肉、豆腐干和牛肉干培养条件下产生的差异代谢物进行了研究,检测得到3种致病菌的基因组信息,且金黄色葡萄球菌有80种差异物质、沙门氏菌有81种差异物质、黄曲霉菌有33种差异物质。

结论:1.通过本研究目的优化的代谢组学研究方法,可达到清晰区分未被致病菌污染和已被致病菌污染的食品的目的,且培养成分越简单,测定所需的样品量越少,反之,则需要进行大量的实验才可清晰地区分。

2. 通过对各组致病菌和空白组的实验数据进行主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,分别筛选出金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和黄曲霉菌在各种底物中19种、16种和14种潜在的特征差异代谢物。

3. 通过对各致病菌的基因组分析,分别构建了各致病菌的代谢途径关系网络图。结果表明生物进化的等级越高,其代谢途径种类越丰富且高级代谢途径越多。

4.利用各致病菌的基因组信息分析筛选出的差异代谢物代谢途径,最终明确了乙酸、乙醇、甘油和1-丁醇在以上3种致病菌中的代谢途径。

参考文献

[1]Microbial Metabolomics:A General Overview.[J].Baidoo Edward E K.Methods in molecular biology（Clifton,N.J.）.2019

[2]Chemometrics advances on the challenges of the gas chromatography–mass spectrometry metabolomics data:a review[J].Kanginejad Atefeh,Mani Varnosfaderani Ahmad.Journal of the Iranian Chemical Society.2018(12)

[3]A comparison of sample preparation methods for extracting volatile organic compounds（VOCs）from equine faeces using HS-SPME.[J].Hough Rachael,Archer Debra,Probert Christopher.Metabolomics:Official journal of the Metabolomic Society.2018(2)

[4]From correlation to causation:analysis of metabolomics data using systems biology approaches.[J].Rosato Antonio,Tenori Leonardo,Cascante Marta,De Atauri Carulla Pedro Ramon,Martins Dos Santos Vitor A P,Saccenti Edoardo.Metabolomics:Official journal of the Metabolomic Society.2018(4)

[5]胡昊.基于代谢组学和基因组信息的食源性致病菌差异代谢物研究[D].昆明理工大学,2019.