胆碱磷酸酯酶2抗体的应用

背景^[1-3]

胆碱磷酸酯酶2抗体是可以特异性结合胆碱磷酸酯酶2蛋白的一种多克隆抗体，主要用于胆碱磷酸酯酶2的体外免疫学检测。

胆碱酯酶（cholinesterase）是一类糖蛋白，以多种同工酶形式存在于体内。一般可分为真性胆碱酯酶和假性胆碱脂酶。真性胆碱酯酶也称乙酰胆碱酯酶（acetylcholinesterase），主要存在于胆碱能神经末梢突触间隙，特别是运动神经终板突触后膜的皱摺中聚集较多；也存在于胆碱能神经元内和红细胞中。此酶对于生理浓度的Ach作用最强，特异性也较高。一个酶分子可水解3×10分子Ach，一般常简称为胆碱酯酶。假性胆碱酯酶广泛存在于神经胶质细胞、血浆、肝、肾、肠中。对Ach的特异性较低，假性胆碱酯酶可水解其他胆碱酯类，如琥珀胆碱。

胆碱磷酸酯酶2免疫组化

胆碱酯酶蛋白分子表面的活性中心有两个能与乙酰胆碱结合的部位，即带负电荷的阴离子部位和酯解部位。酯解部位含有一个由丝氨酸的羟基构成的酸性作用点和一个由组氨酸咪唑环构成的碱性作用点，两者通过氢键结合，增强了丝氨酸羟基的亲核活性，使之易于与乙酰胆碱结合。

胆碱酯酶水解乙酰胆碱的过程可分为三个步骤：①乙酰胆碱分子结构中带正电荷的季铵阳离子头，以静电引力与胆碱酯酶的阴离子部位相结合；同时乙酰胆碱分子中的羰基碳与胆碱酯酶酯解部位的丝氨酸的羟基以共价键形式结合，形成乙酰胆碱和胆碱酯酶的复合物。②乙酰胆碱与胆碱酯酶复合物裂解成胆碱和乙酰化胆碱酯酶。③乙酰化胆碱酯酶迅速水解，分离出乙酸，酶的活性恢复。

应用^[4][5]

用于野艾蒿精油对小菜蛾的生物活性及其作用机制研究

研究野艾蒿（Artemisia lavandulaefolia DC.）精油对小菜蛾[Plutella xylostella（L.）]的生物活性，以及野艾蒿精油对小菜蛾幼虫体内几种酶活力的影响。

结果如下：1、野艾蒿精油对小菜蛾3龄幼虫有较好的触杀作用。且相同时间内，随着剂量的增加，效果越明显。

2、野艾蒿精油对小菜蛾3龄幼虫有一定的胃毒作用。在相同浓度处理下，野艾蒿精油对小菜蛾幼虫的胃毒作用随着时间推移校正死亡率上升幅度较快，尤其是在24h后，试虫死亡速率迅速升高。

3、野艾蒿精油对小菜蛾幼虫具有一定的熏蒸活性。相同时间内，小菜蛾幼虫的熏蒸活性的校正死亡率随浓度的增加而增大。相同浓度处理，小菜蛾幼虫的熏蒸活性的校正死亡率随时间的延长逐渐增大。

4、野艾蒿精油对小菜蛾成虫具有非常明显的熏蒸作用。处理1h后，0.4μL/L处理组校正死亡率为86.67%。处理4h后，0.4μL/L处理组的校正死亡率达100%。

5、野艾蒿精油对小菜蛾成虫的驱避率随着剂量的增加而增大。野艾蒿精油各剂量处理对小菜蛾的驱避率最高达到Ⅴ级。

6、野艾蒿精油对小菜蛾幼虫体内的乙酰胆碱酯酶活力、酸性磷酸酯酶活力、碱性磷酸酯酶活力、羧酸酯酶活力均呈抑制作用。野艾蒿精油对小菜蛾体内的谷胱甘肽-S-转移酶活力和过氧化物酶活力呈先激活后抑制的作用。

参考文献

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[5]Perng,F.S,Yao,M.C,Hung,C.F.eral.Journal of.economic Entomology.1988

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[3]Repllent and growth-inhibiting effects of turmeric oil,sweet flag oil,neem oil and"Margosan-O"on red flour beetle（coleoptera:Tenebrionidae）.Jilani G,Saxena,R,Rua,B.P.Journal of Econometrics.1988

[4]Benner,pesticidal compounds from higher plants.Jill P.Pesticide Science.1993

[5]刘莹.野艾蒿精油对小菜蛾的生物活性及其作用机制研究[D].吉林农业大学,2014.