T淋巴细胞分化蛋白MAL2抗体的应用

背景^[1-3]

T淋巴细胞分化蛋白MAL2抗体是一类可以特异性结合T淋巴细胞分化蛋白MAL2的多克隆抗体，主要用于体外检测T淋巴细胞分化蛋白MAL2的免疫学实验。

T细胞主要在胸腺内发育。当来自胚肝或骨髓的T祖细胞(pro—t)进入胸腺后．会历经受到高度调节的发育过程，其间TCRaβ、CD3以及协同受体CD4和CD8等分子的表达水平不同。成熟T细胞移出胸腺，分布于血液和外周淋巴组织，执行特异细胞免疫和免疫调节功能。

T淋巴细胞分化蛋白MAL2抗体

骨髓中定向分化为T细胞的祖细胞，在进入胸腺之前或进入胸腺被膜下尚未到达胸腺皮质前又称前胸腺(prethymic)淋巴细胞(Pre-T)。Pre—T从进入胸腺皮质后至离开胸腺前，称为胸腺细胞(thymocyte)，成熟的胸腺细胞进入外周血液和外周淋巴组织中称为T细胞。Pre-T细胞在胸腺上皮微环境下不断分化和发育．从皮质外层(outercortex)进入皮质深层，进一步发育为cD4一和CD8双阴性细胞(DN)(其表型为CD3+、CD4-、CD8一、CD25一、TCRaβ一)，但其TCRaβ-CD3可表达于细胞表面．与基质细胞配基结合后，诱导CD4／CD8分子表达。

由此使T细胞发育进入双阳性(CD4+、CD8+)细胞(double posltive，DP)阶段，通过皮髓连接处进入髓质，并发生胸腺内的选择过程，分化发育为具有免疫功能的成熟T细胞，只表达cD4一或cD8‘，故称为单阳性细胞(single positive，SP)。成熟胸腺细胞大部分通过皮髓连接处的毛细血管后静脉进入血液。

应用^[4][5]

用于RSV非结构蛋白对支气管上皮细胞驱动的T淋巴细胞分化的影响研究

人呼吸道合胞病毒（RSV）是引起严重性呼吸道疾病的主要原因之一,是引起后继哮喘发生的重要危险因素。筛选RSV的2个非结构蛋白NS1和NS2在支气管上皮中的相互作用蛋白,检测其诱发支气管上皮细胞异常信号转导,从而探究其驱动T淋巴细胞亚群漂移机制。

方法：构建含NS1或NS2基因的过表达慢病毒载体感染支气管上皮细胞,免疫共沉淀法和质谱法筛选并鉴定其相互作用蛋白；Western blot法鉴定相互作用蛋白泛素化修饰；亚硫酸盐测序检测Notch1基因甲基化；支气管上皮细胞与CD4+T淋巴细胞共培养,流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞亚群分化,ELISA法检测共培养体系上清中细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-17表达。

结果：（1）NSl与组蛋白H2BD相互作用,NS1与组蛋白H2BD相互作用的关键区域是NS1延伸蛋白C区；（2）NS1与组蛋白H2BD相互作用诱导组蛋白H2BD单泛素化修饰；（3）NS1诱导Notch1去甲基化改变；（4）NS1对支气管上皮细胞驱动的T淋巴细胞亚群分化无影响,NS2可抑制Th17的分化,该效应可被泛素化酶抑制剂所逆转。（5）病毒非结构蛋白对共培养体系上清中细胞因子分泌无影响。

参考文献

[1]Proteasome inhibition as a novel mechanism of the proapoptotic activity ofγ‐secretase inhibitor I in cutaneous T‐cell lymphoma[J].E.Biskup,M.R.Kamstrup,V.Manfé,R.Gniadecki.British Journal of Dermatology.2013(3)

[2]Microbial Heat Shock Protein 65 Attenuates Airway Hyperresponsiveness and Inflammation by Modulating the Function of Dendritic Cells[J].Yoo Seob Shin,Katsuyuki Takeda,Yoshiki Shiraishi,Yi Yeong Jeong,Joanne Domenico,Yi Jia,Junyan Han,Ralf Spallek,Mahavir Singh,Joseph J.Lucas,Erwin W.Gelfand.The Journal of Immunology.2012(7)

[3]Blocking the NOTCH Pathway Inhibits Vascular Inflammation in Large-Vessel Vasculitis[J].Circulation.2011(3)

[4]Nuclear Trafficking and Regulation of Innate Immunity by Respiratory Syncytial Virus（RSV）NS1 protein[J].S.Boyapalle,W.Zhang,X.Cao,R.F.Lockey,S.S.Mohapatra.The Journal of Allergy and Clinical Immunology.2009(2)

[5]彭丹.RSV非结构蛋白对支气管上皮细胞驱动的T淋巴细胞分化的影响[D].中南大学,2013.