促甲状腺素受体(抗体)的应用

背景^[1-3]

促甲状腺素受体(抗体)是一类可以特异性结合促甲状腺素受体的多克隆抗体，主要用于检测促甲状腺素受体蛋白的免疫学实验。

促甲状腺激素受体（TSHR）是一种接受促甲状腺激素（thyrotropin）信号，刺激细胞生成甲状腺激素（T4）和三碘甲状腺激素（T3）的跨膜受体。TSHR是膜内在蛋白中G蛋白偶联受体超家族的一员，与Gs蛋白相连接。

促甲状腺素受体免疫组化图

促甲状腺激素受体抗体(TRAb)又称膜受体抗体，是直接作用于甲状腺细胞膜上的TSH受体的抗体，属免疫球蛋白IgG。

根据其作用可分为以下3类：①甲状腺刺激性抗体(TSAb)，又称甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)，与甲状腺滤泡膜上的TSH受体结合，刺激甲状腺肿大，增强其功能活性，是导致Graves病的主要病因。

②甲状腺功能抑制性抗体(TFIAb)：又称甲状腺功能抑制性免疫球蛋白(TFII)，与TSH受体结合后，可抑制甲状腺功能，引起甲低。

③甲状腺生长刺激免疫球蛋白(TGI)：可刺激甲状腺肿大，但不影响其功能。

TRAb对Graves病的诊断、治疗和预后的估计均具有重要的意义。Graves病患者TRAb阳性率可达95%以上，故可作为Graves病的诊断依据。应用抗甲状腺药物治疗时，随着病情的缓解，TRAb的活性可明显下降，当血中甲状腺激素水平正常后，若TRAb逐渐下降，以至转阴，则停药后复发的可能性小;若治疗后TRAb持续阳性，则说明治疗效果欠佳，停药后复发的可能性大。TRAb在甲减和自身免疫性甲状腺炎患者也可出现阳性，有助于以上疾病的病因学诊断。

应用^[4][5]

用于促甲状腺素受体（TSHR）的表达在脂肪细胞分化中的作用及其与肥胖症的关联研究

探讨促甲状腺素受体（Thyroid-stimulating hormone receptor,TSHR）的表达在脂肪前体细胞3T3-L1和3T3-F442A体外分化为成熟脂肪细胞过程中的动态变化及作用。

1、借助于细胞培养技术,以体外培养的脂肪前体细胞3T3-L1和3T3-F442A为实验材料,诱导分化为相应的成熟脂肪细胞。用油红O染色法鉴定脂肪细胞内甘油三酯的形成,并经异丙醇萃取后于紫外分光光度计下检测汕红O在510nm处的吸光度值。

2、收集诱导分化不同时间（第0,2,4,6,8,10及12天）的脂肪细胞,分别进行RNA及蛋白质的提取,以反转录-聚合酶链式反应（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）和蛋白印迹技术（Western Blot）检测脂肪细胞分化标志分子过氧化物酶体增殖因子活化受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor y,PPAR y）和脂肪细胞脂类结合蛋白（adipocyte lipid binding protein,ALBP）在脂肪细胞形成过程中mRNA及蛋白质表达水平的变化。

3、以上述所获得的诱导分化不同时期的脂肪细胞RNA及蛋白质为材料,用RT-PCR和Western Blot技术检测Tshr在脂肪细胞形成过程中mRNA及蛋白质表达水平的变化。

4、借助于免疫荧光细胞化学法,采用倒置相差荧光显微镜检测脂肪前体细胞及成熟脂肪细胞内Tshr的表达情况。

参考文献

[1]Minireview:The neural regulation of the hypothalamic-pituitary-thyroid axis.[J].Costa-e-Sousa Ricardo H,Hollenberg Anthony N.Endocrinology.2012(9)

[2]Comparison of three free T4（FT4）and free T3（FT3）immunoassays in healthy subjects and patients with thyroid diseases and severe non-thyroidal illnesses.[J].Fillée Catherine,Cumps Jean,Ketelslegers Jean-Marie.Clinical laboratory.2012(7-8)

[3]Inhibition of adipogenesis and induction of apoptosis and lipolysis by stem bromelain in 3T3-L1 adipocytes.[J].Dave Sandeep,Kaur Naval Jit,Nanduri Ravikanth,Dkhar H Kitdorlang,Kumar Ashwani,Gupta Pawan.PloS one.2012(1)

[4]Pre-Diabetes,Metabolic Syndrome,and Cardiovascular Risk[J].Scott M.Grundy.Journal of the American College of Cardiology.2012(7)

[5]逯素梅.促甲状腺素受体（TSHR）的表达在脂肪细胞分化中的作用及其与肥胖症的关联[D].山东大学,2012.