人BURKITTS淋巴瘤细胞的应用

背景^[1-3]

人BURKITTS淋巴瘤细胞是由E·Klein和G·Klein于1967年5月从一位16岁黑人男性Burkitt's淋巴瘤患者建立的。Daudi细胞表面免疫球蛋白阳性(sIg+)、Β2-微球蛋白阴性，EBNA阳性，并有衣壳抗原VCA；Daudi细胞携带EB病毒。Daudi细胞是典型的B淋巴母细胞，广泛应用于白血病发生机理的研究。

Burkitt淋巴瘤是1964年Epstein首先从非洲儿童Burkitt淋巴组织中分离出EB病毒，Burkitt淋巴瘤具有明显地方流行性，患者血清中有高价EB病毒抗体，患者淋巴组织培养，可见EB病毒颗粒，20%患者的RS细胞中可以找到EB病毒，是一种可能来源于滤泡生发中心细胞的高度恶性的B细胞肿瘤。

人BURKITTS淋巴瘤细胞

Burkitt淋巴瘤的瘤细胞大小和形态一致，相互粘连，主要由小无裂细胞组成，可伴有少量免疫母细胞。瘤细胞胞界不清，胞质少，嗜双色性，甲基绿派若宁染色呈强阳性，核圆或卵圆形，核膜厚，染色质较粗，核仁明显，可贴近核膜，核有丝分裂象多见。

特殊的是瘤细胞迅速死亡，被成熟的巨细胞吞噬，这些含有吞噬碎片和包涵体样颗粒的巨细胞淡染，均匀地散布于瘤细胞之间呈现所谓的“满天星”图像，是本病的组织学特点。免疫组化染色表明，瘤细胞相当于不成熟的B细胞，个别病例属前B细胞表型，瘤细胞表达全B抗原CD20、CDl9及单克隆性SIg，常为λ轻链，重链可为μ、γ或α，也可表达CALLA，部分病例还表达TdT抗原。

应用^[4][5]

用于姜黄素衍生物FM0807的部分理化性质及抗肿瘤活性研究

对姜黄素衍生物FM0807的部分理化性质和体内外抗肿瘤活性作进一步探索研究。

研究姜黄素衍生物FM0807的部分理化性质及其抗肿瘤作用。

研究方法:（1）影响因素试验观察FM0807的初步稳定性;

（2）利用HPLC法测定FM0807在不同pH值磷酸盐缓冲溶液中的药物水解动力学;

（3）HPLC法测定其在不同溶液中的溶解度、油/水分配系数;

（4）MTT比色法体外测定FM0807对多种癌细胞的影响并和Cur作比较;

（5）应用肉瘤S180小鼠移植肿瘤模型进行体内实验,观察FM0807不同途径给药的抗肿瘤活性并与Cur比较;

（6）应用人Burkitts淋巴瘤CA46细胞裸鼠移植瘤模型进行体内实验,观察FM0807的抗肿瘤活性;

（7）免疫印迹法检测FM0807作用后人Burkitts淋巴瘤CA46细胞中Caspase-3和C-myc蛋白表达水平的变化。

结果:（1）FM0807在高湿条件下稳定,高温环境中少量降解;强光照射条件下不稳定,第10天含量变化显著;

（2）在pH值2～9的PBS中,FM0807的稳定性优于母核Cur;

（3）溶解度试验发现,随着介质pH值的升高,FM0807溶解度降低;且在各介质中,其溶解度均随温度升高而增加;但总体上属于不易溶解物质。

（4）FM0807亲脂性较高,跨过生物膜能力强,药理活性高;

（5）FM0807对CA46、HELA、SGC7901、SW1116等人肿瘤细胞有明显抑制作用,IC50分别为9.20μmol/L,20.80μmol/L,22.90μmol/L,44.73μmol/L;

（6）该药200 mg·kg-1·d-1口服、尾静脉给药,对小鼠S180纤维肉瘤的体内抑瘤率分别为32%、56%;均显著高于等摩尔姜黄素给药组（P<0.05）;

（7）200 mg·kg-1·d-1静脉给药,对人Burkitts淋巴瘤CA46细胞接种于裸鼠构建的肿瘤模型,体内抑瘤率高达67%;（7）FM0807的作用上调了人Burkitts淋巴瘤CA46细胞中Caspase-3的蛋白水平,下调了C-myc蛋白表达水平。

参考文献

[1]Multiple biological activities of curcumin:A short review[J].Radha K.Maheshwari,Anoop K.Singh,Jaya Gaddipati,Rikhab C.Srimal.Life Sciences.2005(18)

[2]Novel targeted and immunotherapeutic strategies in chronic myeloid leukemia[J].Joseph Schwartz,Javier Pinilla-Ibarz,Rui Rong Yuan,David A.Scheinberg.Seminars in Hematology.2003(1)

[3]Curcumin inhibited the arylamines N-acetyltransferase activity,gene expression and DNA adduct formation in human lung cancer cells（A549）[J].Y.S Chen,C.C Ho,K.C Cheng,Y.S Tyan,C.F Hung,T.W Tan,J.G Chung.Toxicology in Vitro.2003(3)

[4]Molecular mechanisms of anti-angiogenic effect of curcumin[J].Anupama E Gururaj,Madesh Belakavadi,Deepak A Venkatesh,Dieter Marmé,Bharathi P Salimath.Biochemical and Biophysical Research Communications.2002(4)

[5]王晓露.姜黄素衍生物FM0807的部分理化性质及抗肿瘤活性研究[D].福建医科大学,2011.