Α-甘露糖苷酶2抗体的应用

背景^[1-3]

Α-甘露糖苷酶2抗体是可以特异性结合Α-甘露糖苷酶2的一类多克隆抗体，主要用于Α-甘露糖苷酶2蛋白的体外免疫学实验。

糖苷酶即糖苷水解酶(Glycoside hydrolases,GH,EC3.2.1)，是一类水解糖苷键(glycosidic bonds)的酶，在生物体糖和糖缀合物的水解与合成过程中扮演着重要角色。

Α-甘露糖苷酶2免疫组化图

糖苷酶几乎存在于所有的生物体中，是一类以内切或外切方式水解各种含糖化合物(包括单糖苷、寡糖、多糖、皂甙和糖蛋白等)中的糖苷键,生成单糖、寡糖或糖复合物的酶。糖苷酶在寡糖合成、烷基糖苷和芳香基糖苷的合成、氨基酸和多肽的糖基化以及抗生素的糖基化方面发挥了重要作用。

糖苷酶在催化糖苷反应时，如果水分子的氧原子进攻受体葡萄糖上的异头碳，即发生水解反应，但如果是葡萄糖羟基上的氧原子进攻受体葡萄糖上的异头碳，即发生转糖基反应。

在N-糖基化过程中所涉及的甘露糖苷酶,依据它们所催化水解键位的不同主要可分为α-甘露糖苷酶和β-甘露糖苷酶,它们分别参与甘露糖α-1, 2、α-1, 3、α-1, 6和β-1, 4糖苷键的水解过程。迄今为止,已克隆的α-甘露糖苷酶cDNA 20多种,其中来自人类的6种。α-甘露糖苷酶主要存在于内质网、高尔基体、溶酶体和胞浆其它细胞器中,功能是剪接寡糖结构末端不同连接的甘露糖残基,形成高甘露糖型、复杂型、杂合型的N-寡糖。

应用^[4][5]

用于高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在卵巢上皮肿瘤组织和细胞株中的表达及相关性研究

检测高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ（Golgiα-mannosidaseⅡ，GMⅡ）、E-cadherin和α-catenin在不同卵巢上皮肿瘤组织和不同转移能力的卵巢癌细胞中的表达及其之间的相关性。

方法：运用免疫组化SP法检测46例卵巢上皮恶性肿瘤（其中有大网膜或淋巴结转移者27例）、15例卵巢上皮交界性肿瘤及12例卵巢上皮良性肿瘤组织中GMⅡ、E-cadherin和α-catenin的表达情况，分析其相关性。体外培养A2780、SKOV-3和HO-8910卵巢癌细胞，分别应用RT-PCR、免疫荧光和蛋白质印迹法检测GMⅡ、E-cadherin和α-catenin mRNA和蛋白的表达情况。

结果：在卵巢上皮恶性肿瘤中GMⅡ的阳性表达率（87%）明显高于卵巢上皮交界性肿瘤（60%）和卵巢上皮良性肿瘤（42%）；E-cadherin、α-catenin的正常表达率（20%和28%）明显低于卵巢上皮交界性肿瘤（80%和60%）和卵巢上皮良性肿瘤（100%和87%），且GMⅡ在有大网膜或淋巴转移的患者肿瘤组织中的阳性表达率明显高于无转移肿瘤者，而E-cadherin、α-catenin正常表达率则明显低于无转移肿瘤者（P＜0.05），GMⅡ与E-cadherin、α-catenin呈负相关。

A2780、SKOV-3和HO-8910细胞中GMⅡ荧光表达逐渐增强，E-cadherin和α-catenin荧光表达逐渐减弱。在A2780、SKOV-3、HO-8910中，GMⅡmRNA和蛋白表达水平逐渐增加，E-cadherin和α-catenin mRNA及蛋白表达水平则逐渐减弱，各组间差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论：GMⅡ、E-cadherin和α-catenin可能在卵巢癌的恶性进展中发挥重要作用，GMⅡ可能成为卵巢癌预后的标志和治疗靶点。

参考文献

[1]Structure,mechanism and inhibition of Golgiα-mannosidase II[J].David R Rose.Current Opinion in Structural Biology.2012(5)

[2]Angiostatic activity of human plasminogen fragments is highly dependent on glycosylation[J].Cancer Science.2010(2)

[3]Suppressive effects of swainsonine on C6 glioma cell in vitro and in vivo[J].Ji-Yuan Sun,Hao Yang,Shan Miao,Ji-Peng Li,Si-Wang Wang,Miao-Zhang Zhu,Yan-Hua Xie,Jian-Bo Wang,Zhe Liu,Qian Yang.Phytomedicine.2009(11)

[4]Role of E-cadherin N-glycosylation profile in a mammary tumor model[J].Biochemical and Biophysical Research Communications.2009(4)

[5]卢玉娟.高尔基体α-甘露糖苷酶Ⅱ在卵巢上皮肿瘤组织和细胞株中的表达及相关性研究[D].重庆医科大学,2013.