甘油磷酸二酯酶磷酸结构域4抗体的应用

背景^[1-3]

甘油磷酸二酯酶磷酸结构域4抗体是可以特异性结合甘油磷酸二酯酶磷酸结构域4蛋白的一类多克隆抗体，主要用于甘油磷酸二酯酶磷酸结构域4的体外体外检测。

分子克隆技术揭示磷酸二酯酶(phosphodiesterases，PDEs)是一个多基因大家族，开发选择性的磷酸二酯酶抑制剂将为多种疾病的治疗开辟新的思路。PDEs是一个多基因的大家族，它包括11型共30余种具有不同底物专一性、酶动力学特征、调控特点以及细胞与亚细胞分布区域不同的磷酸二酯酶同功酶PDEs拥有相似的结构，均包含调控和催化两个功能区域。

甘油磷酸二酯酶结构图

各型PDEs催化区的氨基酸序列75%以上相同．显示出家族成员间的同源性．并决定着对底物或抑制剂的专一性。PDEs具有不同的底物专一性：PDE 4、7、8专一作用于cAMP，而PDE 5、6、9则选择性地作用于cGMP。PDE3以相似的亲和力与cAMP和cGMP结合，但相对较不地水解cGMP，因而在功能上被视作对cAMP专一，cGMP通过与酶作用部位的竞争性结合而起负调控因子作用。

PDEs 1和．2既能水解cAMP，又能水解cGMP，但PDE1因其亚型不同，对两种底物发挥不同的水解效能。PDEs的氨基端调控区域具有高度异源性，反映PDE家族成员的不同的辅助因子。此区域是与钙调蛋白(CaM)(PDE1)、非催化的cGMP(PDE2、5、6)和转导子(transducin)(PDE6)相结合的部位。

另外，PDE3和PDE4氨基端部位还包括膜上的靶区域，PDE1、3、4、5包含蛋白激酶磷酸化部位。这些磷酸化部位能够调节催化活性和(或)亚细胞定位底物和辅助因子的恃异性组合使得cAMP和cGMP系统间的交互作用成为可能。

应用^[4][5]

用于Rho激酶和磷酸二酯酶对环核苷酸依赖性血管舒张作用的调节研究

目前,NO供体被广泛用于心血管疾病的治疗,诸如动脉粥样硬化、高血压、冠心病等。但是,治疗过程中出现的硝酸甘油耐受大大限制了该药的临床应用。

在某些病理生理情况下,血栓素（TxA2）的生成增加,该物质会通过TP受体（thromboxane-prostanoid receptor）激活Rho/Rho激酶通路,引发钙敏感化或抑制NO产生,使血管功能发生异常改变。但是,这种异常改变对cAMP调节的血管舒张作用有何影响还未见报道。

因此,选取大鼠双侧颈总动脉和胸主动脉为观察对象,分别用myograph和organ bath的方法对血管张力进行测定;用激光共聚焦方法对原代培养的大鼠胸主动脉内皮细胞胞内一氧化氮和钙离子浓度进行测定;用ELISA试剂盒检测血管组织内环核苷酸的水平;并用免疫印迹方法对蛋白水平进行检测,旨在观察:激活TP受体对cAMP调节的内皮依赖性和内皮非依赖性血管舒张的影响并探讨Rho激酶和PDE从中的作用;新型PDE5抑制剂T 0156对硝酸甘油耐受的影响以及作用机制是否和增加血管组织内cGMP水平有关。

参考文献

[1]Once Daily Therapy With Isosorbide-5-Mononitrate Causes Endothelial Dysfunction in Humans[J].George R.Thomas,Jonathan M.DiFabio,Tommaso Gori,John D.Parker.Journal of the American College of Cardiology.2007(12)

[2]Bioactivation of Nitroglycerin by the Mitochondrial Aldehyde Dehydrogenase[J].Zhiqiang Chen,Jonathan S.Stamler.Trends in Cardiovascular Medicine.2006(8)

[3]Effect of Resveratrol on Nitrate Tolerance in Isolated Human Internal Mammary Artery[J].Bahar Coskun,Selen Soylemez,Ali Ihsan Parlar,A.Tulga Ulus,S.Fehmi Katircioglu,Fatma Akar.Journal of Cardiovascular Pharmacology.2006(3)

[4]Explaining the Phenomenon of Nitrate Tolerance[J].Thomas Münzel,Andreas Daiber,Alexander Mülsch.Circulation Research.2005(7)

[5][1]刘翠清.Rho激酶和磷酸二酯酶对环核苷酸依赖性血管舒张作用的调节[D].复旦大学,2008.