磷酸化上皮钠通Β抗体的应用

背景^[1-3]

磷酸化上皮钠通Β抗体是可以特异性结合磷酸化上皮钠通Β蛋白的一类多克隆抗体，主要用于磷酸化上皮钠通Β蛋白的体外检测实验。

磷酸化上皮钠通ΒELISA检测示意图

钠离子通道是由内在膜蛋白形成的离子通道，可以让钠离子Na通过细胞膜。钠离子通道可以依启动的方式加以分类，一种是依电压变化而启动的（电压门控型），另一种则是需和其他化学物质（配体）结合后才启动的（配体门控型）。

上皮钠通道（ENaC）是可渗透Na+离子的膜离子通道。它位于肾脏，肺，结肠和其他组织的上皮的顶质膜中，在反式上皮Na+离子转运中发挥作用。具体而言，通过ENaC的Na+转运发生在许多上皮表面，并且在调节盐和水的吸收中起关键作用。

ENaC由三个结构相关的亚基组成，形成一个四聚体通道A，B和γ。随着角质形成细胞的分化，其A和B亚基的表达得以增强。B和γ-ENaC亚基对于浮肿液发挥其作用，对远端肺上皮的净液吸收发挥作用。并且已经得出结论，这些亚基在高眼压小鼠的视网膜中差异表达，因此，A-ENaC蛋白的上调可以作为针对眼内压升高的保护机制。

应用^[4][5]

用于腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭时肾脏上皮钠通道和钠钾氯共转运体的表达研究

肾脏维持机体水盐代谢、酸碱平衡以及内环境稳态主要是通过上皮钠通道（ENaC）、钠钾氯共转运体（NKCC2）和水通道蛋白（AQP2）对水盐代谢的调控来实现的。

为研究慢性肾功能衰竭过程中这些蛋白的变化,本实验通过建立腺嘌呤诱导的慢性肾功能衰竭大鼠模型,应用形态学观察、血尿生化检测、免疫组织化学染色、RT-PCR和Werstern blotting等方法,观察肾脏形态学及各生化指标的变化,肾脏主要的钠通道NKCC2、γ-ENaC以及水通道AQP2 mRNA及蛋白水平的变化,以及NKCC2、γ-ENaC在细胞定位的改变,研究NKCC2和γ-ENaC在慢性肾功能衰竭中所起的作用和其调节机制。研究结果显示,慢性肾功能衰竭时出现多尿,以及电解质紊乱,肾小管上皮细胞NKCC2、AQP2 mRNA及蛋白水平降低,而γ-ENaCmRNA表达增多,蛋白水平却表现出下降趋势,并与功能学指标相关。

研究结果提示:慢性肾功能衰竭是由代偿向失代偿过度的渐进过程,腺嘌呤所致大鼠肾衰肾小管重吸收障碍先于肾小球滤过障碍。大鼠慢性肾功能衰竭时,NKCC2、γ-ENaC蛋白水平降低是导致尿量增多及血钠降低的主要原因之一。

参考文献

[1]Effects of inhibition of the Na+-K+-2C1 cotransporter on myogenic and angiotensin II responses of the rat afferent arteriole.Wang X,Breaks J,Loutzenhiser K,Loutzenhiser R.American Journal of Physiology Renal Physiology.2007

[2]Vasopressin increases Na-K-2C1 cotransporter expression in thick ascending limb of Henle’s loop.Kim GH,Ecelbarger CA,Mitchell C,Packer RK,Wade JB,Knepper MA.American Journal of Physiology.1999

[3]Mechanism of vasopressin action in the renal collecting duct.Knepper MA,Nielsen S,Chou CL,et al.Seminars in Nephrology.1994

[4]NHE3:A Na+/H+exchanger isoform of renal brush border.Biemesderfer D,Pizzonia J,Abu-Alfa A,Exner M,Reilly R,Igarashi P,Aronson PS.American Journal of Physiology.1993

[5]程润芬.腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭时肾脏上皮钠通道和钠钾氯共转运体的表达[D].吉林大学,2009.