酸枣仁皂苷A的制备方法

背景及概述^[1]

酸枣仁皂苷A是在2015年版《中国药典》一部中收载的指标成分。酸枣仁(Ziziphi Spinosae Semen)为鼠李科枣属植物酸枣(Ziziphus jujubaMill.var.spinosa(Bunge)Huex H.F.Chou)的干燥成熟种子,别名枣仁、酸枣核,味甘,性平,具有补肝、宁心、敛汗、生津的作用,用于虚烦不眠,惊悸多梦,体虚多汗,津伤口渴等证,《本草纲目》将其列为上品。酸枣仁药用价值高,其药理作用已被深入研究。酸枣仁皂苷是酸枣仁中含量较高的成分,具有广泛的生物活性,如镇静催眠、抗心肌缺血、抗抑郁、降血脂和降压等。

制备^[1]

一种高纯度酸枣仁皂苷A对照品的制备方法：

A.原料提取：将酸枣仁药材按照体积质量比L/Kg加入5～8倍量的乙醇溶液，所使用的乙醇溶液的体积百分比浓度为60-75％；将酸枣仁药材和乙醇溶液在60℃下热提取至少2次，每次大约2小时，冷却至室温，抽滤，合并滤液，浓缩至无醇味；

B.大孔树脂富集：将步骤A的浓缩液用大孔树脂静态吸附过夜，然后然后分别用2-3倍量柱体积的水和2-5倍量柱体积的15-30％乙醇溶液洗脱杂质，再用1-3倍量柱体积的50-65％乙醇溶液洗脱目标物质，收集洗脱液，浓缩至原体积的1/10；

C.萃取：向步骤B的浓缩液中加入1-2倍量的正丁醇，进行萃取，收集正丁醇层，浓缩以获得步骤(i)中所述的酸枣仁皂苷A醇提物；

D.中压制备：将步骤C的酸枣仁皂苷A醇提物用50％乙腈水溶解上中压制备柱，用30％乙腈洗脱，浓缩得到纯度为60％左右的酸枣仁皂苷A半成品；

E.凝胶纯化：将步骤D所得到的60％左右的酸枣仁皂苷A粗品用50％甲醇水溶解上凝胶柱纯化，用50％甲醇水洗脱，HPLC跟踪检测，收集目标流份，经浓缩、冷冻干燥后，得到纯度为95％左右的酸枣仁皂苷A粗品；

F.高压制备：将步骤E所得到的95％左右的酸枣仁皂苷A粗品用58％甲醇水溶解，进行高压制备，58％甲醇水洗脱，收集目标流份；

G.产品回收：将步骤F得到的高压流份浓缩、冷冻干燥，得纯度为100％酸枣仁皂苷A对照品。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201710860374.4 一种酸枣仁皂苷A对照品的制备方法