棕榈酰三肽-1主要应用于制备美容产品

【背景及概述】^[1][2]

蛋白质翻译后修饰的发生使得蛋白质的结构更复杂、功能更完善，在生物体内起着极为重要的作用，脂类修饰便是其中一种非常重要的翻译后修饰形式。棕榈酸盐是丰度最高的脂肪酸，可被共价修饰到蛋白质上。根据连接方式不同，棕榈酰化修饰可分为 N 型（通过酰胺键连接到 Gly /Cys 残基上）和S型。蛋白质的 S 型棕榈酰化修饰(Palmitoylation) 是指饱和的16 个碳的棕榈酸盐通过硫酯键共价修饰到蛋白质 Cys 的巯基上，它是一种动态、可逆的翻译后修饰形式，可在时间和空间上调节蛋白质的功能。

许多棕榈酰化修饰的可溶或整合膜蛋白质，如信号蛋白质包括在癌症和突触信号中断关键因子、细胞黏附分子和神经递质受体等，可调控蛋白质的活性和稳定性，蛋白-蛋白相互作用，促进蛋白质定位膜脂筏等，在细胞信号传导、代谢、凋亡、疾病的发生和癌变中都起着重要的作用。深入研究和理解蛋白质棕榈酰化修饰的机制，定性和定量分析含这种修饰的蛋白质，以及对棕榈酰化和去棕榈酰化修饰相关酶的理解、动态监控棕榈酰化和去棕榈酰化的周期，对理解复杂信号通路的空间和时间调节等都具有重要意义。

胜肽多种多样，名称似是而非，容易混淆，可参见《美容胜肽的名称 (命名) 和判别》，和棕榈酰三肽-5功能类似的胜肽还有棕榈酰五肽-3 (美丽肽PP-3) 和棕榈酰三肽-1（美容紧肤肽POPT的一个成分）。棕榈酰三肽-1英文名：60351L-Lysine，N-(1-oxohexadecyl)glycyl-L-histidyl-1，分子式：C₃₀H₅₄N₆O₅，序列：Pal-Gly-His-Lys-OH。

【应用】^[3]

棕榈酰三肽-1是美容紧肤肽POPT的一个成分，应用于制备美容产品，棕榈酰三肽-1能够大量促进肌肤胶原蛋白产生，使面部肌肤饱满并赋予弹性，提高肌肤水含量与锁水保湿度，使皮肤触感柔润滑腻，由内而外的提亮肤色不再晦暗。其应用举例如下：

一种祛除生长纹的生物护肤制品，其中，所述的祛除生长纹的生物护肤制品包括基于 水的体系，所述的水的体系包括下述重量份数的组分：仿生纳米微球0.5-10份；月桂基二甲基铵羟丙基水解胶原蛋白1-5份；泛酸0.5-5份；积雪草苷1-3份；芦荟提取液1-5份；表面活性剂1-5份；油5-15份；辅料0.5-15份；水50-75份； 其中在所述的祛除生长纹的生物护肤制品中，所述基于水的体系中还包含治疗有效量的以下组分：寡肽-1；棕榈酰三肽-1；硅烷三醇；N-棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯，以及泛醌。在本发明的一个实施例中，所述的基于水的体系的祛除生长纹的生物护肤制品的各组份的重量份数为：仿生纳米微球1-8份；月桂基二甲基铵羟丙基水解胶原蛋白2-4份；泛酸1-4份；积雪草苷2-3份；芦荟提取液2-4份；表面活性剂2-4份；油6-10份；辅料0.6-10份；水55-70份；具体的所述基于水的体系中含有的有效量的组分的具体量为：寡肽-1500IU/ml-10000IU/ml；棕榈酰三肽-1500IU/ml-10000IU/ml；硅烷三醇10×10-5-5×10-4重量份；N-棕榈酰羟基脯氨酸鲸蜡酯3×10-4-5×10-4重量份；以及泛醌1×10-4-10×10-4重量份。

本发明利用仿生纳米微球技术囊封寡肽-1、棕榈酰三肽-1，防止寡肽-1、棕榈酰三肽-1失活，亲肤纳米囊封，提高皮肤的渗透率，迅速到达肌肤里层，形成养分储库，缓释作用使活性成分均匀释放，增效活性，并减少刺激，很好地解决产品不能渗透的问题。具体而言，本发明利用纳米微球提供一种有效的输送体系，针对性输送，渗透入肌肤里层，保护、增效活性成份，减少刺激、减少过敏。由于一般的纳米微球受活性物浓度、PH值等影响大，容易出现微球聚集的情况，本发明选用的纳米微球本身带有正电荷，相互排斥，因此，仿生纳米微球会相当稳定，仿生纳米微球囊封的活性成份也能稳定、有效的到达皮肤内部发挥作用。故在制成的祛除生长纹的生物护肤制品中，寡肽-1和棕榈酰三肽-很好地囊封在仿生纳米微球中，并能较好地渗透入人的皮肤里层，以更好地修复生长纹，紧实肌肤。

【制备】^[4]

一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法， 包括以下步骤：

1）合成Pal-Gly-OH：将甘氨酸与叔丁醇按质量-体积比为1g：(3～6)mL混合均匀，加入氢氧化钾或氢氧化钠水溶液，搅拌至澄清；降温至0～5℃，滴加棕榈酰氯和氢氧化钾或氢氧化钠水溶液，保持反应体系的pH在7.5～9.5之间，温度控制在5℃以下；甘氨酸与氢氧化钾或氢氧化钠、棕榈酰氯的摩尔比为1：(2.0～2.5)：(1.0～1.2)；甘氨酸与水的质量-体积比为1g：(10～15)mL；滴加完毕撤去冰浴，自然升温至室温搅拌2～3个小时，用盐酸溶液调pH至2～3，过滤，烘干，得到Pal-Gly-OH粗品，粗品用乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇或正庚烷打浆，即得纯品Pal-Gly-OH；

2）合成Pal-Gly-ONb或Pal-Gly-OSU：将步骤(1)获得的Pal-Gly-OH和DMF按质量-体积比为1g：(3～6)mL混合均匀，加入HONb或HOSU，搅拌至溶解，降温至0℃，分批加入EDCI，Pal-Gly-OH、HONb或HOSU和EDCI的摩尔比为1：(1.0～1.2)：(1.1～1.3)；加料完毕撤去水浴升温至室温，搅拌6～10个小时；

3）合成Boc-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl：将H-Lys(Z)-OBzl.HCl与二氯甲烷按质量- 体积比1g：(8～10)mL混合均匀，分批加入碳酸钠，然后加入Boc-His(Trt)-OH，搅拌10分 钟，降温至0℃，分批加入EDCI，H-Lys(Z)-OBzl.HCl、碳酸钠、Boc-His(Trt)-OH和EDCI的摩尔比为1：(1.0～1.1)：(1.0～1.1)：(1.1～1.3)；加料完毕，撤去水浴升温至室温，搅拌4-6 小时，反应液分别用水、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和食盐水洗，浓缩掉一部分二氯甲烷得到 Boc-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl的二氯甲烷溶液；

4）合成H-His-Lys(Z)-OBzl：将步骤(3)获得的Boc-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl的二 氯甲烷溶液降温至0℃，滴加含水10％的三氟乙酸溶液，H-His(Trt)-Lys(Z)-OBzl与三氟乙酸的摩尔比为1.0：(15～20)，滴加完毕，撤去水浴升温至室温，搅拌10～15小时；浓缩掉大部分的二氯甲烷，加水，搅拌，过滤，除去生成的副产物三苯甲醇；滤液转移到反应瓶并降温至0℃，用氢氧化钠、碳酸钠或碳酸氢钠溶液调pH至6.0～8.0之间，过滤，得到H-His-Lys (Z)-OBzl的湿品；

5）合成Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl：向步骤(2)的反应液中加入碳酸氢钠，控制温度低于20℃，分批加入步骤(4)所制得的湿品H-His-Lys(Z)-OBzl，H-His-Lys(Z)-OBzl、碳酸氢钠和Pal-Gly-ONb或Pal-Gly-OSU的摩尔比为1.0：(1.1～1.3)：(1.0～1.2)，加料完毕 室温搅拌2～3个小时，加水，搅拌，过滤，得到Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl的湿粗品，烘干，选用二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯或乙腈打浆，得到精品Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl；

6）合成Pal-Gly-His-Lys-OH：将Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl与甲醇、乙醇或乙酸按质量-体积比1：(8～10)mL混合均匀，氮气保护下加入含量为5％的湿Pd/C，Pal-Gly-His- Lys(Z)-OBzl与湿Pd/C的质量比为1.0：(0.05～0.10)，氮气置换三次，氢气置换三次，室温下搅拌16～20小时，过滤除去Pd/C，滤液浓缩至起始原料Pal-Gly-His-Lys(Z)-OBzl与残留 液体的质量体积比为1g：(2～4)mL，加乙腈、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯或甲醇打浆，过滤，烘干，即得Pal-Gly-His-Lys-OH精品。

【主要参考资料】

[1] 方彩云, 张晓勤, and 陆豪杰. "蛋白质棕榈酰化修饰的分析方法进展." 分析化学 42.4 (2014): 616-622.

[2] 苏晨灿. "棕榈酰三肽-5 在化妆品中的应用." 广东化工 44.22 (2017): 106-107.

[3] 孙百力；韩敏；杨平顺；张泽奇；顾葵；李建超 .一种祛除生长纹的生物护肤制品及其制备方法. CN201110286779.4，申请日2011-09-23

[4] 郑庆泉.一种棕榈酰三肽-1的液相合成方法. CN201810156010.2，申请日2018-02-23