硫氰酸胍的应用举例
发布日期:2021/1/7 15:10:06
背景及概述[1]
硫氰酸胍,化学名:硫氰酸亚氨脲,英文名:Guanidinethiocyanatesalt,其分子式为:(NH2)2C:NH·HSCN(118.2)。是白色结晶体,熔点116~121℃,20℃时,6mol/L在水中的PH值为4.5~6,溶解度为完全溶解。可作为生化试剂,医药中间体。用于油脂工业脱脂,日用化工中作为强脂降解剂,生物制药上的细胞膜破裂剂。
应用[1-3]
应用一、
解放军总医院生化科侯晓峰对硫氰酸胍抑制法检测乳酸脱氢酶同工酶1(LDH1)进行方法学评价及性能验证。方法:对硫氰酸胍抑制法检测LDH1的不精密度、线性分析、回收实验以及正常参考范围等方面进行评价。结果:高、中、低值样本批内不精密度分别为4.25%、1.57%和0.97%,批间不精密度分别为4.57%、2.55%和1.20%;线性分析的稀释健全性良好,R2=0.998;平均回收率为101.56%;LDH1水平在性别间差异无统计学意义;正常参考范围为33.11±5.76U/L。结论:硫氰酸胍抑制法检测LDH1方法可靠、性能良好,符合实验室要求,可在临床广泛开展使用。
应用二、
CN201110146840.5公开了不含基因组DNA的总RNA制备方法,采用十二烷基硫酸钠作为裂解试剂,裂解细胞后使用醋酸钾和十二烷基硫酸钠反应生成十二烷基硫酸钾(PDS)沉淀,同时共沉淀蛋白质以及大部分基因组DNA。然后利用在硫氰酸胍存在时核酸可被酚抽提液吸附,并且吸附的核酸可按分子量大小利用一定浓度醋酸钾解离的性质,在核酸中加入一定浓度的硫氰酸胍和酸性醋酸钾,采用酚抽提分离总RNA和残留的基因组DNA。最后采用乙醇沉淀得到总RNA样品。本法利与现有技术相比,所得RNA样品残留基因组DNA最少,每微克103拷贝(约4皮克)。
应用三、
CN201711222569.2提供一种人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液,包括:1mol/L~8mol/L胍盐、1mM~20mM金属离子螯合剂和pH7.5~8.0的100mM-Tris-HCl缓冲溶液,其中,胍盐选自盐酸胍、异硫氰酸胍和硫氰酸胍中的至少一种,金属离子螯合剂选自乙二胺四乙酸和乙二胺四乙酸的水溶性盐中的至少一种。优选地,还包括1%体积~20%体积的表面活性剂,表面活性剂为非离子型去污剂,非离子型去污剂选自Tween-20、Tween-80、Brij-35、NP40和Triton-100中的至少一种。还提供了相关制备方法和应用。本发明的裂解液能够快速高效裂解细胞,充分释放核酸,满足后续核酸检测用量,适于大规模推广应用。
参考文献
[1]CN201711222569.2人粪便中脱落细胞核酸提取裂解液及其制备方法和应用
[2]侯晓峰,李娟,郭广宏.硫氰酸胍抑制法测定乳酸脱氢酶同工酶1的方法学评价[J].标记免疫分析与临床,2015,22(08):798-799+810.
[3]CN201110146840.5不含基因组DNA的总RNA制备方法
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