丁酰基辅酶A合成酶3抗体的应用

背景^[1-3]

丁酰基辅酶A合成酶3抗体是一类可以特异性结合丁酰基辅酶A合成酶3的多克隆抗体，主要用于体外检测丁酰基辅酶A合成酶3的免疫学实验。

酰基辅酶A acyl－CoA为脂肪酸与辅酶A的硫醇脂化合物（RCO－CoA）。是脂肪酸合成和分解的活性代谢中间物，水解时生成脂肪酸和辅酶A。另外在脂肪酸和辅酶A合成时消耗ATP。

辅酶A（coenzyme A），是一种辅酶，值得注意的是其在合成和氧化脂肪酸的角色，和在三羧酸循环中氧化丙酮酸。所有基因组测序日期编码的酶，即利用辅酶A作为底物，并在4%左右的细胞酶中使用（或硫酯，例如乙酰-CoA）作为基材。在人类中，辅酶A生物合成需要半胱氨酸、泛酸和三磷酸腺苷（ATP）。主要参与脂肪酸以及丙酮酸的代谢。

辅酶A系自鲜酵母中提取而得，为体内乙酰反应的辅酶，可与乙酸盐结合成为乙酰辅酶A，进入氧化过程，对糖、蛋白质及脂肪的代谢有重要作用；体内三羧酸循环、乙酰胆碱的合成、肝糖原的储存、胆固醇量的降低及血浆脂肪含量的调节等，均与辅酶A有密切关系。

应用^[4][5]

用于椰肉发育过程中差异表达基因的分离和功能注释研究

利用SSH法构建了四个SSH文库,并利用Blast2GO软件对这些差异表达序列进行了功能注释。

结果表明：在随机选择的1272个序列的克隆（每个文库约300个克隆）中,有63%的序列与数据库中已知的蛋白质功能类似。通过对文库中阶段特异性表达的序列的GO（gene ontology）id比较分析,筛选得到了6个在椰肉发育过程中持续上调的基因,28个持续下调的基因,28个先短暂性的上调后下调以及9个先短暂性下调然后上调的基因。

以KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）数据库为背景分析发现差异表达基因中有溶血磷脂酸酰基转移酶（LPAAT）、磷脂酶D、乙酰辅酶A羧化酶羧羟基转移酶、3-羟基异丁酰基辅酶A水解酶和丙酮酸脱氢酶与脂肪酸的合成和分解代谢途径有关；磷酸丙糖异构酶、纤维素合成酶和1,3-β葡聚糖苷酶与糖代谢途径相关；另外,磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）既与脂肪酸代谢有关又与糖代谢相关。

从获得的737个非冗余基因中选择了103个阶段特异性表达的基因进行荧光定量PCR的验证。结果显示：SSH文库所得到的序列有效性高达66.6%。综上所述,本研究通过SSH文库构建和生物信息学分析的方法获得了一系列与椰肉发育过程中组织发育、脂肪酸代谢、糖代谢和次生代谢相关的功能基因。

研究的进行将更好地揭示椰肉发育的调控方式,为最终克隆影响椰肉发育及物质代谢的关键基因,并从分子水平上改良果实发育和成熟特性提供更可靠的理论依据。同时,获得的椰子胚乳组织特异表达基因将为其它物种果实品质的改良提供参考资源。

参考文献

[1]Effect of early cold stress on the maturation of rice anthers.Imin Nijat,Kerim Tursun,Rolfe Barry G,Weinman Jeremy J.Proteomics.2004

[2]Photosynthesis and carbon partitioning in transgenic tobacco plants deficient in leaf cytosolic pyruvate kinase.Grodzinski,Jiao,Knowles,Plaxton.Plant Physiology.1999

[3]Production of medium chain saturated fatty acids with enhanced antimicrobial activity from crude coconut fat by solid state cultivation of Yarrowia lipolytica.Parfene Georgiana,Horincar Vicentiu,Tyagi Amit Kumar,Malik Anushree,Bahrim Gabriela.Food Chemistry.2012

[4]Pyruvate kinase:current status of regulatory and functional properties.Ma.Enriqueta Muoz,Elizabeth Ponce.Comparative Biochemistry and Physiology Part B Biochemistry Molecular Biology.2003

[5]梁远学.椰肉发育过程中差异表达基因的分离和功能注释[D].海南大学,2014.