维甲酸和L-抗坏血酸-2-磷酸三钠盐在体细胞重编程过程中的相互正反馈效应

作者猜测有可能的一种解释是RA和AscPNa在参与Asc的合成和降解过程中产生了冲突，于是顺藤摸瓜找到了SVCT和GLUT家族，因为它们发挥转运和维持Asc的作用。结果显示RA诱导的重编程过程中第6天Glut1和Glut3启动子区域的RARA元件被激活，表达升高，对应的Asc在胞内水平也在增加(图2A-D)。接下来，作者测试了MEF细胞在药物诱导早期中，AscPNa对Glut1和Glut3的影响（同时也用了脱氢抗坏血酸DHAA进行比较，但发现DHAA不如AscPNa稳定），结果显示RA能维持诱导初期胞内Asc的水平，并防止后期胞内Asc出现下降(图2E-N)。总而言之，RA有助于维持胞内Asc水平。

反过来，AscPNa对RA的影响是什么呢？同样的思路，RA在体内被CYP26A1和CYP26B1降解。现在AscPNa作用下，这两个酶被抑制了(图3A-B)。然后作者构建了一个含三个RARA元件加TK启动子介导的GFP报告质粒，转染进MEF细胞，当RA处理时，GFP就会表达，撤掉RA，GFP表达就会逐渐下降。而撤掉RA的同时加入AscPNa，GFP仍然有表达(图3C-D)，换成CYP26A1和CYP26B1的启动子，也是同样道理(图3E-F)。接下来作者想到可能是通过AscPNa调控的下游某个转录因子能结合这些启动子来发挥作用的，作者从EMT的角度入手，用TGF-β和TGF-β的抑制剂同样达到了CYP26A1和CYP26B1转录的调控效果(图3G-H)，那作者顺藤摸瓜地想到了EMT中M状态比较重要的一些转录因子，如ZEB1、TWIST1等，通过Pscan软件预测到它们确实能与CYP26A1和CYP26B1启动子相结合，并得到了验证(图3I-K)。这里得出的结论，AscPNa通过诱导MET从而抑制CYP26A1和CYP26B1表达，进而引起RA在胞中的积累。

最后作者总结如下，在iPS诱导的重编程过程中，RA上调Glut1、Glut3等，维持胞内高水平的Asc，进而促进重编程；而AscPNa引起MET发生，从而抑制CYP26A1和CYP26B1表达，最终破坏RA的降解。这种调控机制在其他细胞和生物学行为中均是保守的，所以这个分子机制具有重要意义。