半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体的应用

背景^[1-3]

半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体是一类可以特异性结合半胱胺酸蛋白酶蛋白-12的多克隆抗体，主要用于体外检测半胱胺酸蛋白酶蛋白-12的免疫实验。

半胱氨酸蛋白酶（Caspases）是半胱氨酸蛋白酶家族，是程序性细胞死亡或凋亡的关键介质，是活细胞通往死亡之路的引导者。所有半胱氨酸蛋白酶的前体形式由前结构域和大小催化亚基组成。半胱氨酸蛋白酶的活化由几种刺激产生，包括配体-受体相互作用、生长因子剥夺和细胞功能抑制剂。

所有已知的半胱氨酸蛋白酶都需要在天冬氨酸附近裂解以释放一个大亚基和一个小亚基，这些亚单位结合成a2b2四聚体以形成活性酶。

半胱氨酸蛋白酶包括组织蛋白酶B、H、L等，一般存在于溶酶体，主要参与细胞吞噬和细胞内多余物质的清除和消化。近年来组织蛋白酶B（Cathepsin B，CB）的作用日受重视。正常组织中分离到的CB最适PH为酸性，在中性或碱性条件下无活性，但肿瘤组织中CB却在中性或碱性时活性更高，这似乎更适宜于恶性肿瘤的代谢紊乱。

CB能降解Ⅰ型胶原、LN、PG，并能活化间质胶原酶原和Ⅳ型胶原酶原，降解基质中的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ型胶原纤维。因而参与肿瘤的浸润转移。

应用^[4][5]

用于α-硫辛酸对糖尿病大鼠内质网应激相关分子GRP78和Caspase-12表达的影响

探讨α-硫辛酸（alpha lipoic acid,A-LA）对内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）介导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡的影响。

方法SD大鼠随机分为3组:对照组、糖尿病模型组、α-硫辛酸组。采用链脲佐菌素以60 mg/kg于左下腹腔一次性注射建立大鼠糖尿病模型。

α-硫辛酸组按60mg/kg灌胃,对照组和糖尿病组每日给予等量0.9%氯化钠注射液灌胃。12周后检测血糖和心功能状态;原位末端转移酶标记技术（TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）检测细胞凋亡;Western Blot和免疫组织化学法检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）与和半胱胺酸蛋白酶蛋白-12（Caspase-12）的蛋白表达水平。

结果与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血糖值明显增高（P<0.05）,心功能受损;α-硫辛酸剂量组对糖尿病大鼠血糖和心功能有一定程度的改善。与对照组相比,糖尿病组大鼠心肌细胞凋亡明显增加（P<0.05）,GRP78和Caspase-12蛋白表达增加。α-硫辛酸组心肌细胞凋亡明显降低,GRP78和Caspase-12蛋白表达有所减少。

结论α-硫辛酸对糖尿病心肌组织具有保护作用,其机制可能与降低GRP78表达,拮抗Caspase-12,阻断ERS启动的凋亡通路有关。

参考文献

[1]Organelle-specific initiation of cell death pathways.Ferri K F,Kroemer G.Nature Cell Biology.2001

[2]ER chaperones in mammalian development andhuman diseases.Min N,Amy SL.FEBS Letters.2007

[3]Mediators of endoplasmic reticulum stress-induced apoptosis.Szegezdi E,Logue SE,Gorman AM,et al.EMBO Reports.2006

[4]Cellular abnormalities linked to endoplasmic reticu-lum dysfunction in cerebrovascular disease-therapeutic potential.Paschen W,Mengesdorf T.Pharmacology and Therapeutics.2005

[5]王国贤,李瑞芳,商淑慧,李飞,李兆刚,刘珊珊.α-硫辛酸对糖尿病大鼠内质网应激相关分子GRP78和Caspase-12表达的影响[J].解放军医学院学报,2013,34(01):82-85.