2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯的纯度检测和制备方法

背景及概述^[1-2]

托比司他用于治疗痛风的慢性高尿酸血症，与传统药物别嘌呤醇(嘌呤类似物)相比，不会影响嘌呤及吡啶代谢及其酶的活性，其降低尿酸的作用更强，不需要大剂量重复给药，安全性更好，而2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯为合成托比司他的重要原料。

纯度检测^[1]

2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯合成过程中所产生的杂质主要有异烟酸甲酯和甲基异烟酸N-氧化物。

2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯与主要杂质异烟酸甲酯极性相近，CN201610560075.4提供一种采用等度洗脱实现2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯与相邻杂质峰能完全分离，且峰型佳的方法，实现对2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯含量的准确分析。本发明涉及的一种2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯与其主要杂质完全分离的高效液相色谱纯度检测方法，包括以下步骤：

a、制备供试品溶液：取2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯，用流动相或甲醇溶解，制成浓度为0.5mg/ml～1.2mg/ml的溶液，作为供试品溶液。

b、制备杂质对照品溶液：取异烟酸甲酯和甲基异烟酸N-氧化物，用流动相或甲醇溶解，制成浓度为0.5mg/ml～1.2mg/ml的溶液，作为杂质对照品溶液。

c、采用高效液相色谱分别对供试品溶液和杂质对照品溶液进行检测，检测条件为：色谱柱为C18柱；流动相为甲醇-缓冲盐，甲醇与缓冲液的体积比为10％：90％～90％：10％；进样量为：20ul，流速为0.5ml/min～1.5ml/min；柱温为10℃～40℃；检测波长为200nm～300mn。

d、按峰面积归一化法计算异烟酸甲酯和甲基异烟酸N-氧化物的峰面积。

制备^[2]

向250ml三口瓶中加入甲基异烟酸-N-氧化物(15.31g，0.1mol)和200ml乙腈搅拌全溶后，加入三乙胺(15g，0.15mol)、三甲基硅氰(29.76g，0.3mmol)后氮气保护回流反应20小时，TLC检测反应结束。将溶剂减压蒸馏至干，残留物上硅胶柱层析，用二氯甲烷-甲醇(50：1)洗脱，得到白色结晶体收率13.48g，83.14％。¹HNMR(600MHz，DMSO-d6，δppm)：4.03(s，3H，)，8.11(d，1H，)，7.76(s，1H)，8.26(s，1H)，8.89(d，1H)。

参考文献

[1][中国发明]CN201610560075.4一种2-氰基-4-吡啶羧酸甲酯与其主要杂质完全分离的高效液相色谱纯度检测方法

[2] [中国发明] CN201610150069.1 一种托匹司他杂质的合成方法