山羊抗马IGG/HRP的应用

背景^[1-3]

山羊抗马IGG/HRP是以马IGG为抗原以山羊为免疫宿主的辣根过氧化物酶标记免疫蛋白，可以特异性结合马IGG，主要用于检测马IGG的Western blotting、Immunohistocry、ELISA、IF、IHC-P、IHC-F等生物实验。

IgG是一种抗体，在人类又叫做免疫球蛋白，发挥的是免疫保护作用，当病原体侵入人体可以促使人体产生相应的抗体，其中IgG抗体主要发挥的是持久的保护作用。

从人的血液中提取出免疫球蛋白，它的主要成分是IgG抗体，当病人出现严重感染的时候，可以应用免疫球蛋白，使人体的免疫能力短暂得到提升，使人有可能通过这种短暂的获得性免疫能力度过疾病的危险期，所以应用比较重要。

IgG分子是血液中含量最多的糖蛋白，在正常人血液中，几乎所有Ig G的Fc都含有至少两个保守的N-糖基化位点。此外，在记忆B细胞快速合成大量抗体的过程中，编码轻链或者重链可变区的基因片段可能会通过体细胞超级突变的方式改变抗体可变区的氨基酸序列，该过程极有可能伴随Fab上N-糖基化位点的变化。

IgG的结构及生物学功能显示，ADCC和CDC活性主要与Fc片段的糖链有关系，人源Ig G的Fc上的N-糖链以核心岩藻糖基化的二天线复杂型为主，此外，也存在少量的非核心岩藻糖基化的复杂型或杂合型N-糖链。Fc上的N-糖链不仅影响抗体的结构及热稳定性，而且还可以通过与免疫细胞(NK细胞、巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等)表面的Fc受体结合产生ADCC作用，与补体C1q结合以引起CDC作用，与新生儿Fc受体(neonatal Fc receptor,Fc Rn)结合影响抗体的血清半衰期等。

应用^[4][5]

用于基于IgG物种特异性的家畜鲜肉真实性鉴定可行性研究

以IgG为目标抗原,用免疫琼脂糖凝胶双扩散试验鉴定牛羊肉中掺入马肉、猪肉或鸭肉;观察评价抗IgG血清的交叉反应性,即其物种特异性,探索交叉反应的避免策略;评价掺假肉检出限和结果重现性,从而论证IgG为目标抗原建立免疫学方法鉴别家畜肉真实性的可行性。

结果除了兔抗鸭IgG血清,兔抗马IgG血清、兔抗猪IgG血清与牛和绵羊IgG或肉浸出汁都有一定交叉反应,可将抗血清稀释到合适浓度避免交叉反应的出现。山羊抗马IgG血清、山羊抗猪IgG血清均未发现与牛、绵羊和骆驼IgG或肉浸出汁有交叉反应。说明用牛羊同科的山羊制备目标IgG抗血清,可避免与牛羊IgG发生交叉反应。

制备的山羊抗马IgG血清凝胶双扩散试验效价可达1:32(25),与驴肉浸出汁交叉反应效价可达1:16(24),基本与马IgG反应效价相近,因此不适合用于马肉冒充驴肉的鉴定,但可用于将驴肉掺入其他肉的鉴定。牛和绵羊肉分别按1%、2%、5%、10%、20%和50%掺入马、猪和鸭肉,进行免疫双扩散试验。

结果三种掺假肉的检出限在2%-5%,结果重复性较好,可满足掺假检测需要。IgG为目标抗原鉴定畜禽鲜肉物种掺假具有可行性。免疫双扩散试验可为市场畜禽肉的真实性鉴定提供一种简便、可靠和廉价的技术。

参考文献

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[5]乌恩其.基于IgG物种特异性的家畜鲜肉真实性鉴定可行性研究[D].内蒙古农业大学,2019.