辣根过氧化物酶标记兔抗牛IGG的应用

背景^[1-3]

辣根过氧化物酶标记兔抗牛IGG是以牛IGG为抗原以兔为免疫宿主的辣根过氧化物酶标记免疫蛋白，可以特异性结合牛IGG，主要用于检测牛IGG的Western blotting、Immunohistocry、ELISA、IF、IHC-P、IHC-F等生物实验。

IgG抗体(immunoglobulin G)在免疫应答中起着激活补体，中和多种毒素的作用。IgG抗体持续时间长，是唯一能在母亲妊娠期穿过胎盘保护胎儿的抗体。它们还从乳腺分泌进入初乳，使新生儿时间得到抗体保护。IgG是四链单体，占血清Ig总量的75%，是血清和细胞外液中最主要的抗体成分，可将人IgG分为四个亚类，依其在血清中浓度高低，分别为IgG1、IgG2、IgG3、IgG4。

IgG1、IgG3、IgG4可穿过胎盘屏障，在新生儿抗感染免疫中起重要作用；IgG1、IgG2、IgG4可通过其Fc段与葡萄球菌蛋白A（SPA）结合，借此可纯化抗体，或用于免疫诊断；IgG1、IgG3可高效激活补体，并可与巨噬细胞、NK细胞表面Fc受体结合，发挥调理作用、ADCC作用等；某些自身抗体和引起二、三型超敏反应的抗体也属于IgG。

IGG功能

1.激活补体经典途径，介导溶菌和细胞毒作用；

2.介导ADCC效应；

3.调理吞噬作用；

4.结合SPA；

5.中和毒素和病毒。

在抗感染免疫尤其是再次免疫应答中发挥重要作用。IgG类自身抗体参与Ⅱ、Ⅲ型超敏反应。

应用^[4][5]

用于双抗体夹心ELISA检测奶牛隐性乳房炎的研究

近代则指为多种微生物感染所引起的一种乳腺炎症。奶牛乳房炎是招致奶牛业经济损失最严重，危害奶牛最常见的疾病之一。其病原菌由细菌、真菌及病毒等组成，以细菌居多。在细菌病原中，金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌引起的乳房炎约占整个奶牛乳房炎病例的90％以上。

乳房炎可使奶牛业蒙受重大经济损失，尤其是隐性乳房炎，没有明显的临床症状，但奶牛乳房炎造成的损失约70％是由隐性乳房炎引起的。因此，建立一种简单、快速、准确、有效的检测方法，避免较大的经济损失是十分必要的。

建立了检测奶牛隐性乳房炎的双抗体夹心ELISA方法并进行了初步应用。制备小鼠抗牛IgG。ELISA各反应条件及牛奶如何处理的摸索。制备兔抗牛IgG并以辣根过氧化物酶进行标记。建立了用于诊断奶牛隐性乳房炎的双抗体夹心ELISA诊断方法，并应用此法对434头奶牛的1050份常乳进行了检测，同时以SMT法进行了平行检测。ELISA的检出率为48.9％，ELISA对SMT的阳性符合率和阴性符合率分别为86％和76.9％。

经研究得出结论双抗体夹心ELISA诊断方法敏感性好、特异性和稳定性高，可以作为快速诊断奶牛隐性乳房炎的依据之一。

参考文献

[1]Field trials of a vaccine gainst bovine mastitis 1:evaluation in heifers..Jose A,A ldo CA,Horaco R,et al.Journal of Dairy Science.1997

[2]Diseases of Cattle.Gibbons,W.J.et al..1963

[3]Leukocyte key to udder defense.Current concept of bovine mastitis.1996

[4]Immune mechanism of the bovine udder.An overview.Nickerson S C..1985

[5]高会玲.双抗体夹心ELISA检测奶牛隐性乳房炎的研究[D].吉林农业大学,2007.