Anti-STS-1的应用

背景^[1-3]

Anti-STS-1是以Anti-STS-1为抗原以兔为宿主制得的免疫抗体，可以特异性结合STS-1。主要用于检测STS-1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

唾液酸化修饰是糖链末端重要的糖基化修饰方式之一，主要通过唾液酰基转移酶(sialyltransferases，STs)以胞苷一磷酸-β-N-乙酰神经氨酸(CMP-Neu5Ac)为供体底物，催化唾液酸以不同糖苷键(α2-3、α2-6或α2-8)与糖蛋白和糖脂末端的半乳糖、N-乙酰半乳糖胺或其他唾液酸连接。

真核细胞内的唾液酰基转移酶与其他糖基转移酶类似，同属于Ⅱ型跨膜蛋白，即C端在胞外区而N端在胞内区.典型的唾液酰基转移酶的结构域主要由干区域和催化结构域组成，其中催化结构域包括具有48~49个氨基酸的唾液酸基模体L:()3-C-()2-V-()11-G-()10-R-()12-D-V-G-()4和具有23个氨基酸的唾液酸基模体S:()3-G-()10-C-()8。

.唾液酰基转移酶一般定位于高尔基体，也有部分唾液酰基转移酶能以可溶酶的形式存在。20种唾液酰基转移酶分别为：催化α2-3唾液酸化的ST3GalⅠ~Ⅵ；催化α2-6唾液酸化的ST6GalⅠ~Ⅱ(N-连接)和ST6GalNAcⅠ~Ⅵ(O-连接)；催化α2-8唾液酸化的ST8SiaⅠ~Ⅵ。

唾液酰基转移酶介导的糖复合物表面唾液酸化，因唾液酸结构、连接方式和受体结构的复杂多变，使得唾液酸化的糖复合物具备组织特异性、细胞特异性和分子特异性。

应用^[4][5]

用于LC3-Ⅱ与STS-1、MyD88在全身型幼年特发性关节炎患儿外周血淋巴细胞中的表达及相关性的初步研究

通过研究sJIA患儿外周血淋巴细胞中LC3-Ⅱ表达,为进一步探索自噬在sJIA发生发展中的作用提供线索;通过研究MyD88及STS-1的表达,探索MyD88依赖的Toll样受体信号通路及STS-1是否参与sJIA自噬的发生。进而研究三者间是否有一定的相关性,为防治s JIA的发病提供新策略和新靶点,为临床治疗提供新方向。

方法:研究sJIA患儿及健康体检的儿童各26例。晨起空腹采血后,用“人外周血淋巴细胞分离液”分离得到淋巴细胞。

实验分为两组:(1)对照组:在我院儿童保健门诊健康查体的儿童外周血淋巴细胞;(2)实验组:sJIA患儿外周血淋巴细胞。Western blotting检测淋巴细胞中LC3-Ⅱ、STS-1、MyD88蛋白的表达,结果进行统计学分析,检验有无统计学意义;免疫荧光检测LC3-Ⅱ在淋巴细胞胞浆中的表达。

统计学处理方法:应用SPSS21.0统计软件进行统计学处理,检测数据服从正态分布时采用均数±标准差表示,两样本间的比较应用t检验;数据为非正态分布时用中位数(四分位数间距)表示,两样本间的比较应用非参数检验;通过线性相关分析对实验组数据进行分析;P>0.1为符合正态分布,P<0.05为差异有统计学意义,P<0.01为具有显著性差异。相关系数r<0.2无相关,0.2~0.4弱相关,0.4~0.7显著相关,r>0.7强相关。实验结果均重复三次以上。

结果:与健康儿童比较,全身型幼年特发性关节炎(sJIA)患儿外周血淋巴细胞STS-1表达增高,经t检验两组间具有统计学意义(P<0.05)。对Western所得条带进行半定量分析得到积分光密度值(IOD)终结果分别为健康儿童0.706±0.166,sJIA患儿1.031±0.275。

全身型幼年特发性关节炎(sJIA)患儿外周血淋巴细胞中MyD88表达水平较健康儿童增高,经t检验两组间具有统计学意义(P<0.05)。

参考文献

[1]Pivotal Advance:Inhibition of MyD88 dimerization and recruitment of IRAK1 and IRAK4 by a novel peptidomimetic compound.Loiarro Maria,Capolunghi Federica,FantòNicola,Gallo Grazia,Campo Silvia,Arseni Brunilde,Carsetti Rita,Carminati Paolo,De Santis Rita,Ruggiero Vito,Sette Claudio.Journal of Leukocyte Biology.2007

[2]Lipopolysaccharide upregulates the expression of Toll-like receptor 4 in human vascular endothelial cells.Yang Q W,Zhu P F,W ang Z G,et al.Chinese Medical Journal.2002

[3]Once phosphorylated,tyrosines in carboxyl terminus of protein-tyrosine kinase syk interact with signaling proteins,including TULA-2,a negative regulator of mast cell degranulation.De Castro,Rodrigo Orlandini,Zhang,Juan,Groves,Jacqueline R.,Barbu,Emilia Alina,Siraganian,Reuben P.Journal of Biological Chemistry.2012

[4]Combination therapy with methotrexate and cyclosporine A in juvenile idiopathic arthritis.Ravelli A,Moretti C,Temporini F,Rossi F,Magni-Manzoni S,Pistorio A,Martini A.Clinical and experimental rheumatology.2002

[5]赵洁.LC3-Ⅱ与STS-1、MyD88在全身型幼年特发性关节炎患儿外周血淋巴细胞中的表达及相关性的初步研究[D].河北医科大学,2017.