兔抗小鼠CTLA-4的应用

背景^[1-3]

兔抗小鼠CTLA-4是以CTLA-4为抗原的兔多克隆抗体，可以特异性结合CTLA-4。兔抗小鼠CTLA-4主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等CTLA-4检测实验。

抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。除两者分子构型高度互补外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触，才有足够的结合力。

CTLA-4蛋白由小鼠的Ctla4基因和人类中的CTLA4基因编码。CTLA4或CTLA-4（细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4），也称为CD152（分化簇152），是一种蛋白受体，其作为免疫检查点起作用并下调免疫应答。

CTLA4在调节性T细胞中组成型表达，但在活化后仅在常规T细胞中上调-这种现象在癌症中特别显着。当与抗原呈递细胞表面上的CD80或CD86结合时，它起到“关闭”开关的作用。

细胞毒T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4）又名CD152，是一种白细胞分化抗原，是T细胞上的一种跨膜受体，与CD28共同享有B7分子配体，而CTLA-4与B7分子结合后诱导T细胞无反应性，参与免疫反应的负调节。基因重组的CTLA-4 Ig可在体内外有效、特异地抑制细胞和体液免疫反应，对移植排斥反应及各种自身免疫性疾病有显著的治疗作用，毒副作用极低，是目前被认为较有希望的新的免疫抑制药物。

应用^[4][5]

用于联合抗CTLA-4抗体及JAK2抑制剂治疗小鼠乳腺癌的实验研究

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原（Cytotoxic Tlymphocyte antigen，CTLA-4）作为免疫治疗的靶点之一，用抗CTLA-4抗体封闭CTLA-4信号通路，提高荷瘤机体的免疫能力，治疗黑色素瘤已经取得了重大的突破。然而，单用抗CTLA-4抗体在治疗乳腺癌的研究中，发现没有明显的效果。

探索了小鼠乳腺癌模型的免疫状态，首次提出并试验了联合抗CTLA-4抗体和JAK2抑制剂治疗小鼠乳腺癌。

方法:首先建立小鼠皮下乳腺癌模型，同样条件下用未做任何处理的小鼠作对照，建模21天后，解剖小鼠取脾，用细胞流式术检测：CD4+、CD8+T细胞百分比，骨髓源性抑制细胞（myeloid-derived suppressor cells,MDSCs）和调节性T细胞（regulatory T cells,Tregs）的百分比；

取小鼠骨髓检测MDSC的百分比。继而，与前述同样条件建模，将小鼠分成5组，分别为：空白对照组、溶剂对照组、anti-CTLA-4组、JAK2抑制剂组及联合用药组。接种第3天开始用药，直到第21天。

用细胞流式术对荷瘤小鼠脾和骨髓的细胞亚型进行检测，用免疫组化对肿瘤微环境中凋亡细胞和微血管密度（microvessel density，MVD）进行检测。

参考文献

[1]The importance of animal models in tumor immunity and immunotherapy[J].Sadna Budhu,Jedd Wolchok,Taha Merghoub.Current Opinion in Genetics&Development.2014

[2]ERK1/2 inhibition enhances apoptosis induced by JAK2 silencing in human gastric cancer SGC7901 cells[J].Cuijuan Qian,Jun Yao,Jiji Wang,Lan Wang,Meng Xue,Tianhua Zhou,Weili Liu,Jianmin Si.Molecular and Cellular Biochemistry.2014(1-2)

[3]Targeting CD73 Enhances the Antitumor Activity of Anti-PD-1 and Anti-CTLA-4 mAbs[J].Bertrand Allard,Sandra Pommey,Mark J.Smyth,John Stagg.Clinical Cancer Research.2013(20)

[4]AZD1480:A Phase I Study of a Novel JAK2 Inhibitor in Solid Tumors[J].Elizabeth R.Plimack,Patricia M.LoRusso,Patricia McCoon,Weifeng Tang,Annetta D.Krebs,Gregory Curt,S.Gail Eckhardt.The Oncologist.2013(7)

[5]王建霞.联合抗CTLA-4抗体及JAK2抑制剂治疗小鼠乳腺癌的实验研究[D].吉林大学,2014.