APC标记小鼠抗人CD3单克隆抗体的应用

背景^[1-3]

APC标记小鼠抗人CD3单克隆抗体是一类可以特异性结合人CD3的小鼠单克隆抗体，主要用于检测人CD3的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中人CD3水平。用纯化的人CD3抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人CD3，再与HRP标记的人CD3抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人CD3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人CD3浓度。

在免疫学中，CD3（分化簇3）T细胞的共受体是一种蛋白质复合物，它由四个不同的链组成。在哺乳动物中，该复合物含有一个CD3γ链，CD3δ链，和2 CD3ε链。这些链具有被称为一个分子副T细胞受体（TCR）和ζ-链以产生激活信号的T淋巴细胞。该TCR，ζ链和CD3分子一起构成的T细胞受体复合物。

APC基因是一个很大的管家基因（housekeeping gene）,全长含有一个8538 bp的开放式可读框架，共15个外显子，6个可变地表达.其中第15外显子独自含有6571个bp，组成77%的编码区，是人类已知的外显子，它共编码2843个氨基酸.转录产物mRNA分子为8.9 kb,在很多细胞和组织中均有表达.。

应用^[4][5]

用于CD3、Ki-67和Bcl-2在宫颈癌中的表达及临床意义研究

对CD3、Ki-67和Bcl-2在不同宫颈组织中的表达以及三者与宫颈癌临床病理特征之间关系的研究,探讨三者在宫颈癌发生发展中的作用及意义,为宫颈癌的诊断及分子靶向治疗提供理论依据。方法:1.收集病理确诊的不同宫颈组织标本118例(正常宫颈组织27例、CIN I组织12例、CIN II-III组织28例、宫颈癌组织51例)。

2. 入选标本患者术前均未接受放化疗及生物学治疗,无合并免疫系统相关疾病。

3. 采用免疫组化法检测正常宫颈组织、CIN I组织、CIN II-III组织及宫颈癌组织中CD3、Ki-67和Bcl-2的表达,应用SPSS17.0软件包对所得结果进行统计学分析。

结果:1.CD3阳性表达率随宫颈病变加重而下降,在正常宫颈组织、CIN I组织、CIN II-III组织、宫颈癌组织中表达率为96.3%、75%、57.1%、37.2%,四组间比较,有显著性差异(P<0.05);其中正常宫颈组织分别与CIN I、CIN II-III、宫颈癌组织比较,有显著性差异(P<0.05);CIN I与宫颈癌组织比较,有显著性差异(P<0.05);但CIN II-III与CIN I、宫颈癌组织比较,无显著性差异(P>0.05)。

CD3阳性表达率与FIGO分期、有无淋巴结转移相关(P<0.05),与患者年龄、组织学类型、病理分级无关(P>0.05)。

2.Ki-67在正常宫颈组织、CIN I组织、CIN II-III组织和宫颈癌组织中的阳性表达率依次递增,分别为3.7%、16.7%、53.6%、86.3%,四组间比较,有显著性差异(P<0.05);分别进行两两比较,正常宫颈组织与CIN II-III、宫颈癌组织比较,CIN I与CIN II-III、宫颈癌组织比较,CIN II-III与宫颈癌组织比较,均有显著性差异(P<0.05);但正常宫颈组织与CIN I组织比较,无显著性差异(P>0.05)。

参考文献

[1]Afatinib inhibits proliferation and invasion and promotes apoptosisof the T24 bladder cancer cell line[J].Yunhua Tang,Xiangyang Zhang,Fan Qi,Mingfeng Chen,Yuan Li,Longfei Liu,Wei He,Zhuo Li,Xiongbing Zu.Experimental and Therapeutic Medicine.2015(5)

[2]Diallyl trisulfide-induced apoptosis of bladder cancer cells is caspase-dependent and regulated by PI3K/Akt and JNK pathways[J].Dong Yeok Shin,Gi-Young Kim,Hye Jin Hwang,Wun-Jae Kim,Yung Hyun Choi.Environmental Toxicology and Pharmacology.2014(1)

[3]Predictive ability of estrogen receptor(ER),progesterone receptor(PR),COX-2,Mlh1,and Bcl-2 expressions for regression and relapse of endometrial hyperplasia treated with LNG-IUS:A prospective cohort study[J].Ioannis D.Gallos,James Devey,Raji Ganesan,Janesh K.Gupta.Gynecologic Oncology.2013(1)

[4]A Kinase-Independent Function of CDK6 Links the Cell Cycle to Tumor Angiogenesis[J].Karoline Kollmann,Gerwin Heller,Christine Schneckenleithner,Wolfgang Warsch,Ruth Scheicher,Rene G.Ott,Markus Sch?fer,Sabine Fajmann,Michaela Schlederer,Ana-Iris Schiefer,Ursula Reichart,Matthias Mayerhofer,Christoph Hoeller,Sabine Z?chbauer-Müller,Dontscho Kerjaschki,Christoph Bock,Lukas Kenner,Gerald Hoefler,Michael Freissmuth,Anthony R.Green,Richard Moriggl,Meinrad Busslinger,Marcos Malumbres,Veronika Sexl.Cancer Cell.2013(2)

[5]黄维.CD3、Ki-67和Bcl-2在宫颈癌中的表达及临床意义[D].甘肃中医药大学,2016.