兔抗马多克隆抗体的应用

背景^[1-3]

兔抗马多克隆抗体是一类可以特异性结合马IgG的多克隆抗体，主要用于检测马IgG的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中马IgG水平。用纯化的马IgG抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入马IgG，再与HRP标记的马IgG抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的马IgG呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中马IgG浓度。

抗原通常是由多个抗原决定簇组成的，由一种抗原决定簇刺激机体，由一个B淋巴细胞接受该抗原刺激所产生的抗体称之为单克隆抗体（MonoclonalAntibody）。

由多种抗原决定簇刺激机体，相应地就产生各种各样的单克隆抗体，这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体，机体内所产生的抗体就是多克隆抗体；除了抗原决定簇的多样性以外，同样一种抗原决定簇，也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。

抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。

应用^[4][5]

用于基于IgG物种特异性的家畜鲜肉真实性鉴定可行性研究

畜禽鲜肉及生肉制品掺假和冒充具有一定的普遍性,目前尚无非常成熟、可靠、廉价,并可实现现场检验和商业化开发的鉴别畜禽肉掺假和冒充的方法。免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)是一种存在于血液和组织液中的物种特异性较强的蛋白质。

目前IgG为目标抗原的肉品物种鉴定报道较少。本研究以IgG为目标抗原,用免疫琼脂糖凝胶双扩散试验鉴定牛羊肉中掺入马肉、猪肉或鸭肉;观察评价抗IgG血清的交叉反应性,即其物种特异性,探索交叉反应的避免策略;评价掺假肉检出限和结果重现性,从而论证IgG为目标抗原建立免疫学方法鉴别家畜肉真实性的可行性。

结果除了兔抗鸭IgG血清,兔抗马IgG血清、兔抗猪IgG血清与牛和绵羊IgG或肉浸出汁都有一定交叉反应,可将抗血清稀释到合适浓度避免交叉反应的出现。山羊抗马IgG血清、山羊抗猪IgG血清均未发现与牛、绵羊和骆驼IgG或肉浸出汁有交叉反应。说明用牛羊同科的山羊制备目标IgG抗血清,可避免与牛羊IgG发生交叉反应。

参考文献

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[4]Differentiation of Beef and Kangaroo Meat by Visible/Near‐Infrared Reflectance Spectroscopy[J].H.B.Ding,R.J.Xu.Journal of Food Science.2008(5)

[5]乌恩其.基于IgG物种特异性的家畜鲜肉真实性鉴定可行性研究[D].内蒙古农业大学,2019.