Anti-IL6R抗体的应用

背景^[1-3]

Anti-IL6R抗体是一类可以特异性结合IL6R的单克隆抗体，主要用于检测IL6R的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中IL6R水平。用纯化的IL6R抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入IL6R，再与HRP标记的IL6R抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的IL6R呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中IL6R浓度。

托珠单抗是人源化IL-6受体（IL-6R）的单克隆抗体，可抑制促IL-6信号通路，阻止外周B细胞异常活化，在NMOSD患者中的疗效亟待证实。硫唑嘌呤是一种抑制嘌呤核苷酸生物合成的免疫抑制药，是目前作为治疗NMOSD的一线药物之一，但具有致白细胞降低和肝功能异常等副作用。

NMOSD是一种高复发、高致残性的中枢神经系统自身免疫性疾病，以反复发生的视神经炎和脊髓炎为主要特征。

目前对NMOSD的治疗和世界上其他国家相似，主要以经典的免疫抑制剂如硫唑嘌呤、吗替麦考酚酯等和CD20单抗利妥昔单抗治疗为主。即使应用上述药物，但仍有25-50%的患者在随访期间出现疾病的复发。每次复发会导致疾病残疾的累积，患者的神经系统功能无法恢复到复发前的水平。

应用^[4][5]

用于MicroRNA-451通过下调IL6R基因表达以抑制肿瘤细胞生长的研究

人类miR-451在很多肿瘤中有下调表达，揭示miR-451有可能在肿瘤发生过程中有重要的调控作用，起到类似肿瘤抑制基因的作用，此研究试图从机制各方面揭示这一过程方法：通过预测软件对miR-451的靶基因进行预测，筛选。然后将miR-451模拟物转染到RKO与Hela细胞系中，通过对细胞增殖、细胞周期、侵袭能力的检测，以及在HUVEC细胞中对其形成血管的能力进行检测。

与此同时，对其靶基因白介素6受体（interleukin6receptor,IL6R）的表达，通过实时定量PCR、WesternBlot、及RNAi途径进行检测。结果：RKO和Hela细胞系转染miR-451模拟物后检测到IL6R基因的mRNA表达水平及蛋白表达水平有显著性下调，并且细胞增殖受到抑制，RKO细胞的侵袭水平也受到抑制。

此外，人脐静脉内皮细胞的血管形成能力在转染miR-451模拟物后相比于对照组来说也有极大程度的抑制。以上所有的实验结果，在转染si-IL6R片段的实验组中也得以验证。

结论：IL6R基因为miR-451的一个靶基因，miR-451通过抑制IL6R信号通路以抑制肿瘤发生发展。

参考文献

[1]Human Mesenchymal Stem/Stromal Cells Cultured as Spheroids are Self‐activated to Produce Prostaglandin E2 that Directs Stimulated Macrophages into an Anti‐inflammatory Phenotype[J].Joni H.Yl?stalo,Thomas J.Bartosh,Katie Coble,Darwin J.Prockop.STEM CELLS.2012(10)

[2]MicroRNA-137,a HMGA1 Target,Suppresses Colorectal Cancer Cell Invasion and Metastasis in Mice by Directly Targeting FMNL2[J].Li Liang,Xianzheng Li,Xiaojing Zhang,Zhenbing Lv,Guoyang He,Wei Zhao,Xiaoli Ren,Yuling Li,Xiuwu Bian,Wenting Liao,Wei Liu,Guangying Yang,Yanqing Ding.Gastroenterology.2012

[3]Diet-derived polyphenols inhibit angiogenesis by modulating the interleukin-6/STAT3 pathway[J].Sylvie Lamy,Naoufal Akla,Amira Ouanouki,Simon Lord-Dufour,Richard Béliveau.Experimental Cell Research.2012(13)

[4]Deregulated microRNAs in multiple myeloma[J].LeonidasBenetatos,GeorgeVartholomatos.Cancer.2012(4)

[5]刘栋.MicroRNA-451通过下调IL6R基因表达以抑制肿瘤细胞生长的研究[D].华中科技大学,2012.