ANTI-PD-L1抗体的应用

背景^[1-3]

ANTI-PD-L1抗体是一类可以特异性结合PD-L1的多克隆抗体，主要用于检测PD-L1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中PD-L1水平。用纯化的PD-L1抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入PD-L1，再与HRP标记的PD-L1抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的PD-L1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中PD-L1浓度。

PD-1的全称是程序性死亡受体-1，属于CD28超家族成员，是由268个氨基酸组成的I型跨膜蛋白。它是在1992年由日本京都大学的Tasuku Honjo教授发现的，可在T细胞、B细胞等免疫细胞表面表达。不过在T细胞未活化时，几乎不表达PD-1，仅在T细胞活化之后，PD-1才在T细胞表面表达。

PD-L1(programmed death ligand 1)全称程序性死亡受体配体1，是PD-1（programmed cell death 1,程序性死亡受体1）的配体。PD-L1属于细胞膜上的一个跨膜蛋白，表达在T细胞、B细胞等免疫细胞以及肿瘤细胞上，研究表明当肿瘤细胞膜上的PD-L1与T细胞等免疫细胞上的PD-1结合后，肿瘤细胞发出抑制性信号，进而T细胞不能识别肿瘤细胞和对肿瘤细胞产生杀伤作用，机体的免疫功能受到抑制。

应用^[4][5]

用于PD-L1和PD-1在胃癌组织中的表达及其临床意义研究

采用免疫组织化学PV-6000两步法检测其中PD-L1和PD-1蛋白表达,采用染色强度分级和阳性细胞密度分级的乘积评定PD-L1表达,采用细胞计数法评估PD-1表达,采用SPSS17.0统计软件分析其与患者各项临床指标及预后的关系。

结果:1.胃癌组织中PD-L1蛋白表达阳性率为66.97%,主要定位在胃癌细胞和癌间质淋巴细胞的细胞质和细胞膜,其中癌细胞上表达阳性率为66.05%,癌间质淋巴细胞上表达阳性率为33.94%;

PD-1蛋白表达阳性率为40.83%,主要定位在肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的细胞质和细胞膜;20例癌旁组织均无PD-L1和PD-1蛋白表达。转移淋巴结中PD-L1和PD-1蛋白有表达,并且与其对应的原发肿瘤组织表达高度一致,一致率分别为76.1%和86.7%。

2.胃癌组织中癌间质浸润的淋巴细胞上PD-L1表达与PD-1表达呈显著正相关(P=0.006),而癌细胞上PD-L1表达与PD-1表达无显著相关性(P>0.05)。

3.胃癌细胞中PD-L1表达与p TNM分期(P<0.01)、浸润层面(P<0.01)、淋巴结转移情况(P<0.01)及脉管癌栓(P<0.05)密切相关,而胃癌间质细胞中PD-L1表达仅与淋巴结转移与否(P<0.05)相关。胃癌组织中PD-1表达与各临床病理特征均无显著相关性。

参考文献

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[2]Immune Modulation in Cancer with Antibodies[J].David B.Page,Michael A.Postow,Margaret K.Callahan,James P.Allison,Jedd D.Wolchok.Annual Review of Medicine.2014

[3]Irradiation and anti-PD-L1 treatment synergistically promote antitumor immunity in mice[J].Deng,Liufu,Liang,Hua,Burnette,Byron,Beckett,Michael,Darga,Thomas,Weichselbaum,Ralph R,Fu,Yang-Xin.Journal of Clinical Investigation.2014(2)

[4]Association of T-cell co-regulatory protein expression with clinical outcomes following radical cystectomy for urothelial carcinoma of the bladder[J].E.Xylinas,B.D.Robinson,L.A.Kluth,B.G.Volkmer,R.Hautmann,R.Küfer,M.Zerbib,E.Kwon,R.H.Thompson,S.A.Boorjian,S.F.Shariat.European Journal of Surgical Oncology.2014(1)

[5]吴圣.PD-L1和PD-1在胃癌组织中的表达及其临床意义[D].安徽医科大学,2015.