生物素标记 肿瘤坏死因子抗体

背景^[1-3]

生物素标记肿瘤坏死因子抗体是一类可以特异性结合肿瘤坏死因子的多克隆抗体，主要用于检测肿瘤坏死因子的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中肿瘤坏死因子水平。用纯化的肿瘤坏死因子抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子，再与HRP标记的肿瘤坏死因子抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中肿瘤坏死因子浓度。

抗体生物素—亲和素系统几乎可与目前研究成功的各种标记物结合。生物素与亲和素之间高亲合力的牢固结合以及多级放大效应，使BAS免疫标记和有关示踪分析更加灵敏。它已成为目前广泛用于微量抗原、抗体定性、定量检测及定位观察研究的新技术。

α肿瘤坏死因子（TNFα）是一种主要由巨噬细胞和单核细胞产生的促炎细胞因子，并参与正常炎症反应和免疫反应。α肿瘤坏死因子在许多病理状态下产生增多，包括败血症、恶性肿瘤、心脏衰竭和慢性炎性疾病。在重症类风湿关节炎患者的血液及关节中都可发现肿瘤坏死因子增多。

应用^[4][5]

用于非致死性机械创伤大鼠血清肾上腺素、肿瘤坏死因子-α的变化及其意义研究

通过制备大鼠非致死性机械创伤模型,研究大鼠在非致死性机械创伤后血清肾上腺素(EPI)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化及其与肺损伤的关系,探讨其可能机制及临床意义。

方法8周龄健康雄性Wistar大鼠(山西医科大学实验动物中心提供)40只,体重(200±20)g,随机分为伪创伤组(P)、创伤组(M)、正常对照组(C)、盐酸肾上腺素组(E)和肿瘤坏死因子-α组(T),每组各8只。

部分,伪创伤组和创伤组利用Noble-Collip创伤仪制备大鼠非致死性机械性创伤模型；

第二部分,盐酸肾上腺素组和肿瘤坏死因子-α组以一定体积经腹腔注射入大鼠体内制备药物肺损伤模型,正常对照组以等体积生理盐水腹腔注射入大鼠体内。全部大鼠于造模成功后6h腹主动脉采血处死,HE染色观察肺组织病理变化,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的末端转移法(TUNEL)检测肺组织中细胞凋亡指数,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清肾上腺素和TNF-α含量变化。

结果：血清肾上腺素和TNF-α的变化血清中肾上腺素含量的检测结果：创伤组(1.7306±0.1394)ng/ml与伪创伤组(0.1712±0.0193)ng/ml相比含量明显增高,差异有统计学意义(p<0.01)。

参考文献

[1]ATTENUATION OF REPERFUSION LUNG INJURY AND APOPTOSIS BY A2A ADENOSINE RECEPTOR ACTIVATION IS ASSOCIATED WITH MODULATION OF Bcl-2 AND Bax EXPRESSION AND ACTIVATION OF EXTRACELLULAR SIGNAL-REGULATED KINASES[J].Julia Rivo,Evelyne Zeira,Eithan Galun,Sharon Einav,Joel Linden,Idit Matot.Shock.2007(3)

[2]The key role of apoptosis in the pathogenesis and treatment of pulmonary hypertension[J].Emin Gurbanov,Xiao Shiliang.European Journal of Cardio-Thoracic Surgery.2006(3)

[3]Systemic Inflammation and Disseminated Intravascular Coagulation in Early Stage of ALI and ARDS:Role of Neutrophil and Endothelial Activation[J].Satoshi Gando,Takashi Kameue,Naoyuki Matsuda,Atsushi Sawamura,Mineji Hayakawa,Hirokatsu Kato.Inflammation.2004(4)

[4]Lung Inflammatory Responses and Hyperinflation Induced by an Intratracheal Exposure to Lipopolysaccharide in Rats[J].Anne-Helene Jansson,Christina Eriksson,Xiangdong Wang.Lung.2004(3)

[5]贾国平.非致死性机械创伤大鼠血清肾上腺素、肿瘤坏死因子-α的变化及其意义[D].山西医科大学,2011.