ANTI-ALPHA-ACTININ的应用

背景^[1-3]

ANTI-ALPHA-ACTININ是一类可以特异性结合ALPHA-ACTININ的多克隆抗体，主要用于检测ALPHA-ACTININ的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中ALPHA-ACTININ水平。用纯化的ALPHA-ACTININ抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入ALPHA-ACTININ，再与HRP标记的ALPHA-ACTININ抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的ALPHA-ACTININ呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中ALPHA-ACTININ浓度。

辅肌动蛋白有辅肌动蛋白-1、2、3和4四种类型,呈细胞或组织特异性分布.这四种蛋白的共同结构特征是在细胞内均为反向平行的二聚体,并具有N末端肌动蛋白结合结构域(ABD)、血影蛋白样中央重复结构域和C末端"EF手"结构域。

作为细胞骨架中一种重要的肌动蛋白交联蛋白,辅肌动蛋白通过与其相关蛋白包括整合素(integrins)、钙粘素(cadherin)以及细胞信号传导通路中的信号分子等,例如斑联蛋白（zyxin）的协同作用,在稳定细胞粘附、调节细胞形状及细胞运动中发挥着重要作用。因此,肿瘤的发生、发展和恶化与辅肌动蛋白的结构、功能密切相关。

应用^[4][5]

用于2型糖尿病患者尿液α-actinin-4含量与糖尿病痛病相关性探讨研究

2型糖尿病(T2DM)患者尿液αactinin-4的表达变化,分析α-actinin-4与糖尿病肾损伤、糖尿病肾病的关系。

方法：选择T2DM患者124例、正常对照组30例。根据24h-尿白蛋白将T2DM患者分为三组,即24h-尿白蛋白<30mg的正常尿蛋白组60例,30mg≤24h-尿白蛋白<300mg的微量蛋白尿组32例,24h-尿白蛋白≥300mg的大量蛋白尿组32例。

所有入选对象均收集一般资料如性别、年龄、病程等,测量血压、体重、身高,计算体重指数；

应用ELISA法测定尿液a-actinin-4的含量,常规方法测定血、尿肌酐、血尿素氮、胱抑素C、血糖、糖化血红蛋白、C-肽、血脂等临床指标,按照Hojs R提出的公式估算eGFR。以SPSS13.0软件分析统计,不服从正态分布的指标经对数转换处理后统计,率的比较以x2进行,多组间比较采用单因素方差分析及q检验,消除混杂因素影响采用协方差分析；

两组间比较采用t检验；指标间的相关分析采用spearman目关分析、偏相关分析及多元回归分析；尿α-actinin-4对DM患者肾功能的影响采用logistic回归分析,以P<0.05为差异有统计学意义,比较各组尿α-actinin-4含量的差异,分析尿α-actinin-4含量与各临床指标的相关性。

参考文献

[1]Urinary mRNA markers of epithelial–mesenchymal transition correlate with progression of diabetic nephropathy[J].Lin‐LiLv,Jian‐DongZhang,Kun‐LingMa,Bi‐ChengLiu.Clinical Endocrinology.2012(5)

[2]Mice with podocyte-specific overexpression of wild typeα-actinin-4 are healthy controls for K256E-α-actinin-4 mutant transgenic mice[J].Jean-Louis Michaud,Erin Stitt-Cavanaugh,Nicole Endlich,Karlhans Endlich,Yves Repentigny,Rashmi Kothary,Chris R.J.Kennedy.Transgenic Research.2010(2)

[3]Evidence of O-linked N-acetylglucosamine in diabetic nephropathy[J].Life Sciences.2009(13)

[4]Epithelial-Mesenchymal Transition as a Potential Explanation for Podocyte Depletion in Diabetic Nephropathy[J].Yukinari Yamaguchi,Masayuki Iwano,Daisuke Suzuki,Kimihiko Nakatani,Kuniko Kimura,Koji Harada,Atsushi Kubo,Yasuhiro Akai,Masao Toyoda,Masao Kanauchi,Eric G.Neilson,Yoshihiko Saito.American Journal of Kidney Diseases.2009(4)

[5]廖钰.2型糖尿病患者尿液α-actinin-4含量与糖尿病痛病相关性探讨[D].广西医科大学,2012.