ANTI-DCR1的应用

背景^[1-3]

ANTI-DCR1是一类可以特异性结合ANTI-DCR1的多克隆抗体，主要用于检测ANTI-DCR1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中ANTI-DCR1水平。用纯化的ANTI-DCR1抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入ANTI-DCR1，再与HRP标记的ANTI-DCR1抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的ANTI-DCR1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中ANTI-DCR1浓度。

肿瘤坏死因子受体家族包括TNF-RI、FAS、DR3、DR4、DR5和DR6，在各个生理系统中调控细胞凋亡方面起着重要作用。受体由细胞因子家族激活，该家族包括TNF、FasL和TRAIL。它们的特点是含有一个高度保守、富含半胱氨酸的重复序列的胞外区和一个胞内保守的约80个氨基酸的死亡结构域(DD)通过募集其他含有DD的接头蛋白（FADD、TRADD、RIP）至死亡诱导信号转导复合体(DISC)，并进而导致caspase激活，DD在转导死亡信号中发挥重要作用。

凋亡受体信号转导还受诱饵受体家族（DcR1、DcR2和DcR3）控制，这些诱饵受体缺少胞质DD并且通过对配体竞争而抑制死亡受体介导的凋亡。诱饵受体的表达提供了某些类型癌症调节凋亡的机制并且可能有助于化疗敏感性

应用^[4][5]

用于TRAIL及其受体DR5、DcR1在初发和复发尖锐湿疣患者皮损中的表达及意义的研究

采用S-P法,即免疫组化过氧化物酶标记链酶卵白素法,检测30例初发尖锐湿疣患者皮损组织、30例复发尖锐湿疣患者皮损组织中TRAIL蛋白及其受体DR5、DcRl的表达情况,30例正常皮肤组织作对照组。免疫组化染色结果采用半定量法判定,所得数据运用SPSS17.0统计分析软件进行统计分析。

结果1、TRAIL蛋白的免疫阳性产物定位于胞膜和胞浆,多呈棕黄色颗粒状沉着,阳性细胞主要分布在棘细胞层。TRAIL蛋白在对照组、尖锐湿疣初发组、尖锐湿疣复发组的阳性表达率分别为91.67%、83.33%和80.00%,呈递减趋势；其表达强度在对照组与尖锐湿疣组间比较,对照组高于尖锐湿疣初发组和尖锐湿疣复发组,差异有统计学意义(p<0.05),而在尖锐湿疣初发组和尖锐湿疣复发组,二者比较无统计学意义(p>0.05)。

2、DR5蛋白的免疫阳性产物主要定位于细胞浆,多为浅黄色至棕黄色片状或弥漫性着色。染色阳性细胞主要分布在基底细胞层和棘细胞层。DR5蛋白在对照组、尖锐湿疣初发组、尖锐湿疣复发组的阳性表达率分别是53.33%、83.33%和93.33%,呈递增趋势；其表达强度在对照组与尖锐湿疣组间比较,对照组低于尖锐湿疣初发组和尖锐湿疣复发组,差异有统计学意义(P<0.05)；而在尖锐湿疣初发组和尖锐湿疣复发组,二者比较无统计学意义(P>0.05)。

3、DcRl蛋白的免疫阳性产物定位于胞浆和胞膜,多为浅黄色至棕黄色片状或弥漫性着色。染色阳性细胞主要分布在棘细胞层。DcR1蛋白在对照组、尖锐湿疣初发组、尖锐湿疣复发组的阳性表达率分别100%、57.50%、40.00%。呈递减趋势。其表达强度在任两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。

结论TRAIL在尖锐湿疣皮损组织中的异常低表达,可能与尖锐湿疣的发病有关。

参考文献

[1]Phase 2 study of mapatumumab,a fully human agonistic monoclonal antibody which targets and activates the TRAIL receptor-1,in patients with advanced non-small cell lung cancer[J].F.Anthony Greco,Philip Bonomi,Jeffrey Crawford,Karen Kelly,Yun Oh,Wendy Halpern,Larry Lo,Gilles Gallant,Jerry Klein.Lung Cancer.2008(1)

[2]Improvement of Expression Level and Bioactivity of Soluble Tumor Necrosis Factor-Related Apoptosis-Inducing Ligand(Apo2L/TRAIL)by a Novel Zinc ion Feeding Strategy[J].Ai-You Sun,Ya-Ling Shen,Ji-Cheng Yin,Hong Zhang,Ya-Nan Tang,Dong-Zhi Wei.Biotechnology Letters.2006(15)

[3]Regulation of TNF-Related Apoptosis-Inducing Ligand-Mediated Death-Signal Pathway in HumanβCells by Fas-Associated Death Domain and Nuclear FactorκB[J].D.Ou,X.Wang,D.L.Metzger,M.Robbins,J.Huang,C.Jobin,J.K.Chantler,R.F.L.James,P.Pozzilli,A.J.Tingle.Human Immunology.2005(7)

[4]Twist Regulates Cytokine Gene Expression through a Negative Feedback Loop that Represses NF-κB Activity[J].Cell.2003(2)

[5]乔锰.TRAIL及其受体DR5、DcR1在初发和复发尖锐湿疣患者皮损中的表达及意义的研究[D].山东大学,2012.