ANTI-HISTONE H3 (DI METHYL K4)抗体的应用

背景^[1-3]

ANTI-HISTONE H3(DI METHYL K4)抗体是一类可以特异性结合Anti-HISTONE H3(DI METHYL K4)的多克隆抗体，主要用于检测Anti-HISTONE H3(DI METHYL K4)的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中Anti-HISTONE H3(DI METHYL K4)水平。用纯化的Anti-HISTONE H3(DI METHYL K4)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入Anti-HISTONE H3(DI METHYL K4)，再与HRP标记的Anti-HISTONE H3(DI METHYL K4)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Anti-HISTONE H3(DI METHYL K4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中Anti-HISTONE H3(DI METHYL K4)浓度。

组蛋白（histone）是指所有真核生物的细胞核中，与DNA结合存在的碱性蛋白质的总称。其分子量约10000～20000Kda。

真核生物体细胞染色质中的碱性蛋白质，含精氨酸和赖氨酸等碱性氨基酸特别多，二者加起来约为所有氨基酸残基的1/4。组蛋白与带负电荷的双螺旋DNA结合成DNA-组蛋白复合物。因氨基酸成分和分子量不同，主要分成5类。

组蛋白对染色体的结构起重要的作用。染色体是由重复单位──核小体组成。每一核小体包括一个核心8聚体（由4种核心组蛋白H2A、H2B、H3和H4的各两个单体组成）；长度约为200个碱基对的脱氧核糖核酸(DNA）；和一个单体组蛋白H1。长度为147碱基对的DNA盘绕于核心8聚体外面。在核心8聚体之间则由长度约为60个碱基对的DNA连接。

应用^[4][5]

用于H3K4me3在中耳胆脂瘤中的表达及临床意义研究

组蛋白H3K4me3在中耳胆脂瘤中的表达目的:量化组蛋白H3赖氨酸4的三甲基化(H3K4me3)在中耳胆脂瘤母组织及外耳道上皮组织中的表达,以研究其在中耳胆脂瘤发生、发展过程中的重要意义。

以中耳胆脂瘤患者的胆脂瘤母组织为实验组,及同一患者的外耳道上皮组织为对照组,根据免疫印迹实验(Western blot)结果分析H3K4me3的表达水平;得到Western blot结果后,进行免疫组织化学染色实验验证Western blot实验结果,并定位H3K4me3在实验组和对照组中的表达。

结果:1.免疫印迹实验结果显示组蛋白H3K4me3在胆脂瘤母组织中的表达水平的明显低于外耳道上皮组织,两者差异有统计学意义。

2. 免疫组织化学染色结果显示组蛋白H3K4me3在胆脂瘤上皮组织以及外耳道上皮组织中均有表达,定位于胆脂瘤上皮组织以及外耳道上皮组织细胞核中,表现为上皮组织细胞核中棕黄色或棕褐色颗粒;胆脂瘤母组织中组蛋白H3K4me3的表达量明显低于外耳道上皮组织,两者差异有统计学意义。

结论:组蛋白H3K4me3在中耳胆脂瘤上皮组织中表达明显下调,可能参与了中耳胆脂瘤发生和发展过程,其有可能成为治疗中耳胆脂瘤的新靶点。

参考文献

[1]H3K4me3 and Wdr82 are associated with tumor progression and a favorableprognosis in human colorectal cancer[J].He Liu,Yongmin Li,Jingwen Li,Yanlong Liu,Binbin Cui.Oncology Letters.2018(2)

[2]IGF2BP1:a novel binding protein of p38 MAPK[J].Jacob Rini,Moorthy Anbalagan.Molecular and Cellular Biochemistry.2017(1-2)

[3]Histone H3K4 methylation-dependent and-independent functions of Set1A/COMPASS in embryonic stem cell self-renewal and differentiation[J].Christie C.Sze,Kaixiang Cao,Clayton K.Collings,Stacy A.Marshall,Emily J.Rendleman,Patrick A.Ozark,Fei Xavier Chen,Marc A.Morgan,Lu Wang,Ali Shilatifard.Genes&Development.2017(17)

[4]MLL2,Not MLL1,Plays a Major Role in Sustaining MLL-Rearranged Acute Myeloid Leukemia[J].Yufei Chen,Konstantinos Anastassiadis,Andrea Kranz,A.Francis Stewart,Kathrin Arndt,Claudia Waskow,Akihiko Yokoyama,Kenneth Jones,Tobias Neff,Yoo Lee,Patricia Ernst.Cancer Cell.2017(6)

[5]王志远.H3K4me3在中耳胆脂瘤中的表达及临床意义[D].青岛大学,2019.