苯乙醇胺甲基转移酶抗体的应用

背景^[1-3]

苯乙醇胺甲基转移酶抗体是可以特异性结合苯乙醇胺甲基转移酶的一类多克隆抗体，主要用于检测苯乙醇胺甲基转移酶的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中苯乙醇胺甲基转移酶水平。用纯化的苯乙醇胺甲基转移酶抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入苯乙醇胺甲基转移酶，再与HRP标记的苯乙醇胺甲基转移酶抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的苯乙醇胺甲基转移酶呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中苯乙醇胺甲基转移酶浓度。

PNMT是一种位于肾上腺髓质的酶，它催化儿茶酚胺生物合成途径的最后一步，该过程将去甲肾上腺素甲基化形成肾上腺素（肾上腺素）。PNMT具有β-咔啉2N-甲基转移酶活性。PNMT参与调节肾上腺素的产生。糖皮质激素受体形成独立于DNA结合域的PNMT的多聚体。PNMT表达在小鼠妊娠后期受AP2-alpha和糖皮质激素的调节。

应用^[4][5]

用于苯乙醇胺-N-甲基转移酶基因多态性与湖南地区汉族人群原发性高血压易感性的关联研究

高血压病(Essential Hypertension,EH)是目前最常见的心血管病之一,是全球范围内的重大公共卫生问题。原发性高血压是遗传易感性和环境因素共同决定的复杂疾病。人群30～60%的血压变异归因于遗传因素。

目前对高血压病遗传危险因素的研究,大多采用候选基因的策略,位于17号染色体q21位置上的苯乙醇胺-N-甲基转移酶(PNMT)基因是其中之一。PNMT是儿茶酚胺生物合成的终点酶,能催化去甲肾上腺素生成肾上腺素,其活性变化可影响体内去甲肾上腺素和肾上腺素的水平,从而参与高血压病的病理生理过程,故编码PNMT的基因是研究原发性高血压易感性重要的候选基因之一。

探讨苯乙醇胺-N-甲基转移酶(PNMT)G-390A基因多态性与湖南地区汉族人群原发性高血压遗传易感性的关系。

方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的分析方法,在400例原发性高血压患者和388例健康人群中对PNMT基因PNMT G-390A位点进行基因分型。应用χ~2检验比较组间基因型及A等位基因频率的分布的异同,并检验不同性别组间基因型及A等位基因频率的分布异同;

应用非条件Logistic回归分析对风险因素进行校正,确定PNMT基因型与原发性高血压遗传易感性间的相关性关系;应用单向方差分析检验高血压组与对照组不同基因型的一般情况差异。

参考文献

[1]Association study between reward dependence temperament and a polymorphism in the phenylethanolamine N-methyltransferase gene in a Japanese female population[J].Emi Yamano,Tokiko Isowa,Yoshiro Nakano,Fumihiko Matsuda,Tomoko Hashimoto-Tamaoki,Hideki Ohira,Shinji Kosugi.Comprehensive Psychiatry.2008(5)

[2]Significance of Heritability in Primary and Secondary Pediatric Hypertension[J].Renee F.Robinson,Donald L.Batisky,John R.Hayes,Milap C.Nahata,John D.Mahan.American Journal of Hypertension.2005(7)

[3]Arterial hypertension as a public health issue in Slovenia[J].Rok Accetto.Blood Pressure.2005(S2)

[4]Hypertension and SNP genotyping in antihypertensive treatment[J].Lisa Kurland,Ulrika Liljedahl,Lars Lind.Cardiovascular Toxicology.2005(2)

[5]陈安.苯乙醇胺-N-甲基转移酶基因多态性与湖南地区汉族人群原发性高血压易感性的关联研究[D].中南大学,2009.